甲状腺球蛋白免疫组织化学在甲状腺癌诊断中的应用.pdf

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1、第17卷第4期2008年8月中国组织化学与细胞化学杂志CHⅡ虹￡SEJOURNALOFHISIDCHEMI姗YANDCy玎，CH日Ⅵ巧砸lYVbl．17．No．4Aug．2008甲状腺球蛋白免疫组织化学在甲状腺癌诊断中的应用李琦陈丽华宋朝君王鑫张涛董芸金伯泉(第四军医大学免疫学教研室，陕西，西安710032)甲状腺球蛋白(thyroidglobulm，Tg)是甲状腺滤泡，l：皮细胞合成的一种大分子糖蛋白。甲状腺滤泡上皮起源的甲状腺癌，约占甲状腺恶性肿瘤的80％，这些癌细胞可以不同程度的合成T官，在癌细胞胞浆中可见T奢分布状况[11。本文利用

2、制备的抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体建立甲状腺球蛋白免疫组织化学方法，对判断甲状腺滤泡细胞源性癌有特异诊断意义。(关键词]甲状腺球蛋白；甲状腺癌'。(中图分类号)R736．1(文献标识码)ADOI：10．3870／礓毖hx2008．04．015材料和方法1．材料甲状腺癌及自体正常组织芯片购自桂林泛谱生物技术有限公司，疫组化染色试剂盒(ElivisionPlus)为福州迈新公司产品。2．方法将组织芯片经二甲苯和梯度酒精脱蜡至水，0．01mol／LPBS浸洗5m×3次，修复抗原20min(pH6．0柠檬酸修复液，90℃)，0．3％甲醇一双氧水室温孵

3、育30rain以消除内源性过氧化物酶活性，0．01mol／LPBS浸洗5min×3次，20％NCS室温封闭30min，弃去封闭液，滴加抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体，室温孵育lh，0．01mol／LPBS浸洗10minx3次，滴加增强剂室温孵育20min，0．01mol／LPBS浸洗10min×3次，加HRP一羊抗鼠二抗室温孵育30min，0．01mol／LPBS浸洗10min×3次，DAB显色10min，Mayer苏木精衬染，脱水，透明，中性树胶封片。结果和讨论从甲状腺滤泡上皮细胞起源的甲状腺癌，如甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡性痛约占甲状腺恶性

4、肿瘤的80％。这些癌细胞可以不同程度的合成Tg，在癌细胞胞浆巾可见Tg的分布[3

5、。本文中6例乳头状癌组织和6例滤泡性癌组织癌细胞胞浆均发现有阳性染色，而且在滤泡性癌的滤泡腔内和乳头状[收稿日期]2007—12-02(修回R期]2008—01—22(基金项闷]国家科技支撑汁划课题(2006队F07801)[作者简介)李琦，女(1965年)，汉族，高级实验师。癌的乳头间质和间隙内可见阳性产物(图1A，B)。1例未分化癌胞浆也见有阳性产物。而由甲状腺C细胞起源的甲状腺髓样癌(4例)无阳性着色(图1C)。在甲状腺癌中，绝大多数为分化性癌(乳头状癌

6、、滤泡癌或混合型癌，其组织起源为甲状腺上皮细胞)，少数为低分化癌(由甲状腺C细胞起源的甲状腺髓样癌)和未分化癌[21。我们的实验证实甲状腺乳头状癌和滤泡性癌甲状腺球蛋白染色均为阳性，而f}l甲状腺非滤泡细胞起源的髓样癌为阴性，与文献报导相符【3】。因此利用免疫组织化学方法显示甲状腺滤泡细胞甲状腺球蛋白染色，是区别甲状腺滤泡细胞源性肿瘤十分有用的鉴别方法。另据文献报导非甲状腺转移的淋巴结肿瘤甲状腺球蛋白的组织染色为阴性[3]，因此在术前活检时怀疑淋巴结转移癌为甲状腺癌转移时，作为甲状腺球蛋白的组织染色更有诊断价值。另外，根据甲状腺球蛋白染色不

7、但可以提高甲状腺滤泡细胞源性癌的诊断正确性，还可以显示癌与非癌滤泡细胞的功能状态[4]。分化好的乳头状癌和滤泡性癌合成甲状腺球蛋白水平明显高于低分化或未分化甲状腺癌r4]。冈此特异敏感的甲状腺球蛋白免疫组织化学染色方法为各类甲状腺癌的鉴别诊断提供了技术手段。参考文献C13CaturegliP，BeerR；FfitzschG，etal，Epitopesonthyroglobulin：astudyofpatientswiththyroiddisease．Autoimmunity，1994，18(1)：41C23白耀(t编)．甲状腺病学(基础与临

8、床)，第1版．北376中国组织化学与细胞化学杂志第17卷京：科学技术文献出版社，2003，338--349[3]BurrA。GoudieRB．Diagnosisofprimarythyroidcarci—nornabyimmunohistologicaldemonstrationofthyro-globulin．Histopathology。1979。3：279[43Alobores—saavedraJ．Thyroglobulinincarcinomaofthethyroid：Animmunohistochemicalstudy．HunlP

9、athol，1983，14：62图版说明图1甲状腺球蛋白免疫组织化学染色结果X40A甲状腺乳头状癌B甲状腺滤泡性癌C甲状腺髓样细胞癌D．阴性对照EXPLANATIONOFFIGU