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1、新几内亚凤仙组织培养及试管内开花试验摘要：以新几内亚凤仙花种子无菌萌发的试管苗为材料,探讨了激素对芽增殖、生根以及试管内开花的影响。结果表明：芽增殖最适培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA,35d顶芽增殖倍数为3.0,侧芽增殖倍数为5.3,生根率同步达100%;试管内诱导开花的最适培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA,其开花率达90%,平均每颗苗开花数为2.2朵，花期长达60do关键词：新几内亚凤仙;增殖;试管内开花收稿日期:20120329作者简介：郭云贵(1977-)，女，湖北新洲人，硕士，讲师，主要从
2、事细胞工程方面的教学与研究工作。中图分类号：S681.1文献标识码：B文章编号：16749944(2012)050001021引言新几内亚凤仙(Impatienshawkeri)属凤仙花科凤仙花属宿根草本花卉，别名五彩凤仙花，为原产新几内亚的杂交种，具有株型大、花朵大、花期长、开花多、花色品种丰富，温度适宜可周年开花等特点。传统的繁殖方法是采用无行抒插或种子繁殖，新几内亚凤仙具有不稔性而不易结实,种子价格比较贵，发芽率低;茎段抒插成活率低，繁殖速度慢，且抒插苗形态不佳。用组织培养技术既可除去病毒又可壮苗快繁，可在短期内提供大量优质试管苗。该实验以新几
3、内亚凤仙花种子为研究材料，建立了离体组织培养快繁体系并实现了试管内开花,在此基础上进一步探讨了激素配比对试管苗开花的影响。2材料与方法供试材料为新几内亚凤仙花种子，北京市芳萱苑种子有限公司生产。2.1凤仙花初代无菌系的建立将凤仙花种子用双层纱布包扎起来，放在广口瓶中，自来水冲洗10min后转移至工作台上，先用70%酒精浸泡30s,然后置于2.0%次氯酸钠中消毒15-20min,再用无菌水冲洗5次,接种于MS0培养基中，平均每只试管接入2-3颗种子，培养14d开始试验。2.2凤仙花芽增殖培养试验将顶芽和侧芽分别接种于以下6种不同激素配比的培养基：6-B
4、A0.5+NAA0.2;6-BA0.5+NAA0.5;6-BA1.0+NAA0.2;6-BA1.0+NAA0.5;6-BA2.0+NAA0.2;6-BA2.0+NAA0.5,35d统计芽增殖倍数,芽增殖倍数二可用增殖的芽总数/接种芽数。2.3凤仙花组培苗诱导试管内开花将增殖后获取的芽接种于以下4种培养基(KH1)6-BA1.0+NAA0.1;(KH2)6-BA1.0+NAA0.2;(KH3)6-BA2.0+NAA0.1;(KH4)6-BA2.0+NAA0.2中,60d后密切注意开花情况,统计开花率与平均开花数。开花率(％)二开花苗数/接种苗数X100
5、%;平均花朵数二总开花朵数/接种苗数。2.3培养条件除特殊说明外，生根以1/2MS为基本培养基，其他以MS为基本培养基，培养基均添加0.8%琼脂粉和3%蔗糖以及0.1%的活性炭，调pH值为5.8;培养温度为259左右,光照强度为1000-2OOOIx,光照周期为10h/do3结果与分析3.1不同浓度6-BA.NAA配比对凤仙花芽增殖效果的影响种子萌发的实生苗多含顶芽和第一对侧芽，在芽增殖试验中分别统计得表4和表2。表1不同激素配比对凤仙花顶芽增殖的影响培养基编号BA/(mg/l)NAA/(mg/l)35d增殖倍数生长状况10.50.22.80植株矮小
6、或茎伸长，但茎细弱、芽稍多、叶油绿20.50.53.30植株较高、芽稍多、叶嫩且油绿、叶片肥大31.00.23.33植株高、叶油绿、芽多41.00.53.17植株矮小、芽稍多、叶嫩但颜色稍浅52.00.22.60茎伸长，叶片卷曲且细长，多生长于顶端62.00.52.57茎伸长，叶片卷曲且细长，多生长于顶端表2不同激素配比对凤仙花侧芽增殖的影响培养基编号BA/（mg/L）NAA/（mg/L）增殖倍数35d生长状况10.50.22.67植株最矮、茎粗、叶片细长、颜色深20.50.55.29植株最高、叶片肥大、颜色深31.00.22.08植株矮小瘦弱、叶片
7、细长、颜色浅绿41.00.53.00植株矮小、叶片多而细长卷曲、颜色浅绿52.00.22.36植株高、叶片细长嫩绿62.00.52.86植株矮小、叶片细长嫩绿统计结果表明:顶芽及侧芽在2号培养基上均有较高的增殖倍数且植株肥壮,为芽增殖的最适宜培养基。图1完整植株图2试管花蕾在芽增殖实验中,岀现了不同程度的生根现象（图1）,35d时生根率全部达到100%,同时在126d时，意外观察到4号培养基中出现了一个肉眼可见的花蕾（图2）o故在此基础上进一步开展了开花培养基的优化（图3、图4）。图3试管开花图4不同颜色的试管花3.2不同浓度6-BA.NAA配比对凤
8、仙花开花效果的影响将凤仙花组培苗接种于诱导开花培养基上后，第79d在KH4号培养基中最先发现了肉眼可见的花蕾
