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1、2011,45(1):41～44/厍大亮,等中国兽药杂志·41·口蹄疫灭活疫苗的生产工艺概述厍大亮,李冬(中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046)[收稿日期]2010-02-28[文献标识码]A[文章编号]1002-1280(2011)01-0041-04[中图分类号]S859.797[摘要]灭活疫苗仍然是当前防控口蹄疫使用的主要疫苗,因此研究灭活疫苗生产工艺具有非常重要的现实意义。详细论述了口蹄疫灭活疫苗生产过程,并对近年来生产工艺方面的一些研究进展做了简要介绍。[
2、关键词]口蹄疫灭活疫苗;生产工艺;质量控制DescriptiononFootandMouthDiseaseVaccineProductionProcessSHEDa-liang,LIDong(KeyLaboratoryofAnimalVirologyofMinistryofAgriculture,NationalFoot-and-mouthDiseaseReferenceLaboratoryofChina,StateKeyLaboratoryofVeterinaryEtiologicBiology,LanzhouVeterinaryResearchIn
3、stitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Lanzhou730046;China)Abstract:InactivatedvaccinesarestillthemainvaccinesinFMDcontrolprogrammes.Developmentofinactivatedvaccineagainstfootandmouthdiseaseisofgreatrealisticsignificance.ThearticleDiscussedindetailtheproductionprocessofFMD
4、inactivatedvaccinesandreviewedtheadvancedstudiesontheimportantstepstodevelopFMDinactivatedvaccines.Keywords:inactivatedfoot-and-mouthdiseasevaccines;process;qualitycontrol口蹄疫(FMD)灭活疫苗是利用常规技术制造液分散成单个细胞后加营养液震荡,使细胞分散于的以灭活病毒为抗原的一类疫苗,是通过实验筛选营养液中,再将此营养液按一定比例分装于若干圆的田间毒株作为疫苗种毒,经病毒培养系统大量
5、增柱形细胞瓶中,给细胞瓶加塞扎口后放置于转瓶机值,对获得的病毒灭活处理添加佐剂制成的疫上37℃旋转培养,使营养液中的细胞附着于瓶壁,[苗1],灭活疫苗因其安全有效而被广泛应用。交替接触营养液而分裂增值。传统的消化液采用[2]1灭活疫苗的生产工艺EDTA-胰酶,沈青等报道以柠檬酸钠-胰酶作1.1细胞培养BHK-21细胞系于1962年问世,消化液,只需一次加30mL浸润整个细胞面后倒掉现已成为制备FMD疫苗所需病毒抗原的理想细胞即可,缩短了消化时间,减少了细胞在用力震荡时受系,被广泛应用于FMD疫苗生产。在疫苗生产中,到的伤害。使用柠檬酸钠-胰酶消化BHK
6、-21细抗原能否获得满意效价很大程度取决于细胞的形胞连续传代超过百代,细胞仍然形态一致,活力良态及生长状况,因此细胞培养是疫苗生产中十分重好。细胞分种率一般在1∶6到1∶12之间,低于1∶7要的环节。疫苗生产中BHK-21细胞的培养方法分种不利于企业成本控制,同时细胞培养容易老化主要有转瓶培养和悬浮培养两种。影响其活力。高于1∶9分种率则会影响细胞的密1.1.1转瓶培养转瓶培养是将种子细胞用消化度,培养时间也会延长,而且会影响到细胞连续传代作者简介:厍大亮(1979年-),男,甘肃金昌人,研究实习员,硕士,从事动物传染病及病原分子流行病学研究。通讯作者
7、:李冬。E-mail:lidongpaul@yahoo.com.cn·42·中国兽药杂志2011,45(1):41～44/厍大亮,等[3]的稳定性,因此控制在1∶7到1∶9较为理想。即可收取病毒液,病毒液经菌检及效检合格后方可转瓶培养因其所需设备简单,操作方法容易掌进入下一环节。实践证明病毒液反复冻融使细胞握,培养的细胞形态良好而在我国被广泛的采用,破裂,充分释放包含的病毒粒子,可提高病毒效价。但这种方法也有一些缺点,例如:细胞瓶单位体积转瓶病毒培养属劳动密集型方法,较难控制污染且的产量比较低;工作人员的劳动强度很大;不易控容易散毒,但生产的病毒液效价
8、比较高。制污染。悬浮培养法增值病毒是当反应器中悬浮培养71.1.2悬浮培养悬浮培养中细胞附着于
