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1、新型生物降解材料PHB细胞相容性探究汤苏阳艾玉峰董兆麟杨青芳司徒镇强摘要目的：本文对新研制的聚B務基丁酯(PHB)这一生物可降解材料进行细胞相容性研究。方法:采用L929小鼠成纤维细胞，经材料高温浸提液、常温浸出液与L929细胞接触及直接在PHB膜片上种植该细胞，运用四哇盐比色法(MTTassay)测定其1,3,5天L929细胞的相对增殖率及其毒性程度。结果:PHB材料在高温及常温下物理、化学性质稳定。结论:PHB细胞相容性好，细胞毒性程度0级。关键词PHB生物降解材料细胞相容性比色法THEEVALUATIONAT
2、THECYTOTOXITYOFPOLY-B-HYDROXYBUTYRATEATTHEFIBROBLASTSOFMICEINVITROTangSuyang,AiYufeng,DongZhaolin,etalChinesePLA205Hospital(Jingzhou121000)AbstractAin：ApplicationofMTTassaytoevaluatethecytotoxityofpoly-3-hydroxybutgrateatthefibroblastsofmice・Methods：Applicaioh
3、tionlogarithmicgrowthofL❷❷929cellsofmiceimplantinginthedifferentcnditionsofPHBtomeasuretherelatiegrowthrateat1,3,5days・ResuIts：PHBisstableathighandnormaltemperature.Conclusion：PHBhavegoodcytocompatibilityandnearlynocytotoxity.KeywordsPoly-Phydroxybutyratebiode
4、gradablematerialsCytocompatibilityMTT聚B餐基丁酯(Poly-Phydroxybutyrate简称PHB)是由微生物产生的聚酯,1927年由法国MLemoigne首次从巨大芽鞄杆菌(Bac订lusmegatherium)提取得到。它具有高熔点、高结晶度、高分子量的特点，拉伸程度与聚丙烯大致相同,而且PHB更耐紫外线，不易引起炎症，生物相容性好；由于其由微生物制造，完全不含有重金属等有毒物质，是极洁净的生物塑料［1］。它在生物体内可以完全降解，它的最终产物是B轻基丁酸、二氧化碳和水
5、，因此，可做为新的生物医学材料。英国ICI公司已研制PHB作为无须拆除的外科缝线,商品名为Biopol,该材料在创伤外科、整形外科、美容外科等外科领域及在药学领域方面有着广泛的应用前景，如外科可吸收缝线，软组织植入、骨固定材料、神经修复、抗青光眼手术、药物缓释系统等。❷目前国内对于PHB材料的生物相容性研究方面未有报道，本文对新研制的国产聚轻基丁酯进行细胞毒性的实验研究，评价该材料的细胞相容性。1材料与方法1.1聚B密基丁酯膜片(〈500um)二醋酸二丁基锡析聚氯乙烯膜片，高密度聚乙烯膜片。1.2浸提液制备1.2.
6、1高温浸提液的制备将聚B軽基丁酯膜片、二醋酸二丁基锡析聚氯乙烯膜片各2cm❷2,经过清洁洗涤,75%酒精洗两次，再加10倍量蒸馅水摇洗，两次沥干，加生理盐水20ml,置于1211容器中浸提1小时。1.2.2常温浸出液制备分别将聚B-務基丁酯、二醋酸二丁基锡析聚氯乙烯膜片用清洁洗涤消毒，分别加入含有10%胎牛血清的RPMI164020ml培养在5%CO❷2和95%空气、379培养箱内24小时后取出膜片。1.2.3将聚B轻基丁酯膜片、二醋酸二丁基锡析聚氯乙烯膜片、高密度聚乙烯膜片制成大小与96孔板孔底的大小形状一致,制
7、备消毒过程同上。1.2.4方法将96孔板分成三个区域：I区，高温浸提液区；II区，常温浸出液区；III区，直接接触膜片区。❷应用2X10个细胞/mlL929细胞悬液接种于3块96孔塑料培养板上，每组5孔，每孔100卩1（III区在接种细胞前已置入孔内3种膜片），培养24小时以使细胞贴壁,24小时后进行培养液交换，即I区舍弃原培养液加各种50%高温浸提液+RPM11640各100uloII区舍弃原培养液分别加各种常温浸出液200u1,空白对照组用新鲜的RPMI1640200U1交换。III区各孔用新鲜培养液RPMI1
8、640200H1交换。令然后置入培养箱培养，分别于1、3、5天各取出一块培养板，每孔加入20H1MTT溶液继续培养6小时，然后吸出孔内液体每孔加入150111二甲基亚枫，振荡10分钟后，用DG-1型酶联免疫检测仪(华东电子管厂)在490nm波长检测光吸收值(0D),取5孔平均值，再通过下列计算相对增殖率(RelativegrowthrateRGR)[2]。❷
