植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒.doc

《植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料ABTS氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。技术背景超氧自由基阴离子（sup

2、eroxideradical；O2-）、过氧化氢（hydrogenperoxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxylradical；OH-）、过氧化基（peroxylradical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、单线态氧气（singletoxy

3、gen）等细胞内活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。通过过硫酸钾（potassium

4、persulfate）氧化2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonicacid)，diammoniumsalt；ABTS）产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基或者消耗抗氧化剂的能力，在分光光度仪（730nm波长）的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。产品内容缓冲液（ReagentA）毫升染色液A（ReagentB1）管染色液B（ReagentB2）毫升氧化液（ReagentC）毫升标准液（R

5、eagentD）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品存放和标准品配制的容器4℃微型台式离心机：用于样品处理496孔板：用于比色的容器分光光度仪或酶标仪：用于比色变化实验步骤一、样品准备选择一：血浆样品1．准备好肝素或ACD抗凝管（注意：避免使用EDTA抗凝管）2．抽取1毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf5415）4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．

6、即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．移取10微升上述制备的血浆到新的1.5毫升离心管7．加入xx微升缓冲液（ReagentA），混匀8．放在冰槽里待测选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取1毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为2000g（或5000RPM，例如eppendorf5415）5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．移取10微升上述制备的血清到

7、新的1.5毫升离心管8．加入xx微升缓冲液（ReagentA），混匀9．放在冰槽里待测选择三：尿液/脑脊液/唾液/精液样品1．准备好1.5毫升离心管2．移取1毫升液体到离心管3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf5415）4．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．移取10微升到新的1.5毫升离心管7．加入xx微升缓冲液（ReagentA），混匀8．放在冰槽里待测二、标准液准备1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管2．移取xx微升标

8、准液（ReagentD）到1号管3．小心移取xx微升缓冲液（ReagentA）和xx微升标准液（ReagentD）到2号管，混匀4．小心移取xx微升缓