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时间:2020-03-16
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1、各功能室工作制度1.细胞培养室工作制度(1)细胞培养室由研究人员和技术人员负责管理,具体指导临时工每周彻底清扫消毒一次,监测层流质量,每月作细菌培养一次(包括空气、物品),维护保养仪器设备,观察CO2培养箱温度、湿度、气体浓度是否正常,保管仪器零配件。(2)工作前半小时先启动空调机,然后打开层流室风机、超净台风机及紫外灯开关。紫外灯消毒时间以半小时为宜,不得无故延长时间。实验操作完毕后清理超净台、工作台台面,培养箱把手处、显微镜台面、超净台台面均用75%酒精擦拭消毒。离开实验室前先关空调机,然后关层流室风机。(3)在细胞培养室工作,必须严格遵守无菌原则。进培养室前
2、洗手,在一更室换鞋,在二更室穿消毒隔离衣,戴口罩及帽子,风淋去尘,喷雾消毒手。(4)进入培养室的物品必须消毒,否则勿入。放入培养箱内培养器皿必须无菌,器皿外周可用75%的酒精擦拭消毒。(5)缓冲间干燥箱只准存放消毒后的物品、器皿。水浴箱每周一换一蒸水一次,并加入新洁尔灭和亚硝酸钠。(6)进出培养室应及时关门。2.细胞库管理制度(1)细胞库由技术员负责管理。技术员负责检查细胞入库出库登记,负责每周一检查、添加液氮,所需液氮必须提前两天准备好。(2)细胞株、组织标本入库,必须注明使用者姓名、冻存物名称、数量浓度,经二人查对,按要求填写登记表,二人签字后冻存。细胞株、组
3、织标本分罐保存。(3)每次复苏细胞、取组织标本,必须经二人查对入库登记资料,并进行出库登记签字。(4)细胞库只负责保存在本室进行研究工作人员所需的细胞、组织标本,外单位人员要求细胞入库,或索取本室保存的细胞株须经中心主任批准。(5)每年进行两次保存细胞株的清理工作,已毕业研究生或研究人员废弃的冻存细胞或组织标本,经本人同意,处理后销毁。3.细菌培养室工作制度(1)细菌培养室由技术人员负责管理,每周彻底清扫消毒一次,维护保养仪器设备,保管仪器配件。(2)工作前半小时开净化工作台层流排风、紫外灯开关,操作完毕后清理超净台、工作台台面,并用消毒液擦拭。(1)废弃的菌液、
4、菌种及容器必须经煮沸消毒后,再丢弃。4.荧光显微镜室工作制度(1)荧光倒置显微镜室由技术员负责清洁卫生、仪器保养维护和零配件的保管,督促检查使用登记。(2)任何人使用荧光倒置显微镜需事先与技术员联系,学会操作方法后,才可单独使用。(3)使用荧光倒置显微必须登记使用起始时间,荧光显微镜不可频繁开关,每次使用持续时间最好不超过2小时,使用完毕后立即关灯,而且需等汞灯冷却后才可再次开灯,以防高压汞灯寿命缩短。(4)在使用过程中,如出现意外情况,应立即关掉汞灯,并通知仪器负责人。(5)每次使用荧光显微镜后都应将油镜头擦拭干净、切断电源、盖罩。5.PCR室工作制度(1)PC
5、R室由技术员负责保养维护仪器、保管仪器零配件、检查工作区清洁卫生。(2)进行PCR实验时,应严防扩增产物污染造成假阳性结果,故PCR准备工作、PCR扩增、PCR扩增产物的检测应分区进行。(3)PCR及逆转录PCR的预处理在准备间超净台上进行。(4)荧光定量PCR由技术员操作,其他人员不得自行开机。6.电泳区工作制度(1)电泳工作区由技术员负责保养维护仪器、保管仪器零配件、检查工作区清洁卫生。(2)用微波炉煮胶时,应避免含溴化乙锭(EB)的凝胶煮沸后溢出污染托盘,如果溢出,必须立即清除干净,否则以损坏仪器论处。(3)电泳完毕后,及时清洗电泳槽。使用凝胶成像仪后,及时
6、擦拭残留在暗箱内工作台面上的电泳液,以免腐蚀台面。(4)若需接触EB必须戴专用手套,凡被EB污染的物品禁止拿到非EB区,凡被EB污染的手套禁止接触非EB区的任何东西。废弃的含EB的凝胶必须放入指定的桶内,以便统一处理。7.洗涤室工作制度(1)洗涤室由技术员负责管理,具体指导临时工制备一蒸水、正确使用高压锅消毒,定期配制、更换酸液。(2)需浸泡酸的玻璃、塑料器皿,必须清洗一遍,并晾干后用塑料网装好,然后浸入酸液内,浸泡时间不要超过48小时,若不及时取出,按无主处理。金属器皿禁止泡酸。细胞培养所需器皿与普通器皿分缸浸泡。(1)制备蒸馏水时,制备人员不得离开,注意在制备
7、蒸馏水期间不得断水源,若突然停水,必须立即关掉电源,防止干烧损坏蒸馏仪。(2)高压消毒时,消毒人员不得离开,应严格掌握压力和时间,以保证灭菌效果,灭菌完毕后,必须待气压表的指针下降至“0”处,方可打开锅盖,以免发生危险。定期监测高压锅的灭菌效果。注意高压锅的保养工作,每日使用前洗刷一次,加足水,严禁干烧。(3)已消毒物品与未消毒物品应严格分开放置,避免混淆。8.烤箱使用制度(1)烤箱由技术员负责管理,监督研究人员严格执行操作规程,注意安全,严防事故发生。(2)玻璃器皿高温烘烤时,必须有专人看管,不得用布类、纸类、塑料物品包裹,可用锡纸盖口。烘烤完毕后待烤箱温度下降
8、至40℃以
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