月季的花药培养_关晶晶.ppt

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1、月季的花药培养点此播放教学视频知识回顾单倍体育种的过程？花药离体培养（N）单倍体植株（N）秋水仙素处理，使染色体翻倍植株（2N）特点：1明显缩短育种年限2后代植株都为纯合子。正常植株（2N）1、被子植物定义：凡是种子有果皮包被着，胚珠有子房壁包被着的植物，就叫做被子植物一、被子植物和裸子植物2、裸子植物定义：凡是胚珠裸露，外面没有子房壁包被，种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物实例：玉米、大豆、梨、杏实例：松、杉、柏点此播放教学视频点此播放教学视频被子植物的花的结构：点此播放教学视频花的作用被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分

2、二、被子植物花粉粒的形成花丝花药：囊状结构，内有很多花粉粒1、雄蕊的结构雄蕊：点此播放教学视频花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞2、被子植物的花粉发育①经历时期：四分体时期、单核期、双核期点此播放教学视频②花粉粒的形成花粉母细胞（小孢子母细胞）减数分裂四分体时期（进入单核期）有丝分裂单核靠边期(小孢子)单核居中期(小孢子)小孢子（单核花粉粒）精子精子有丝分裂花粉管细胞核生殖细胞核生殖细胞营养细胞双核期两个精子和一个营养核的基因型相同1花粉母细胞4个小孢子减分有分4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有分8个精子1个小孢子母细胞4个小孢

3、子4个花粉粒1个小孢子1个花粉粒2个精子1个营养细胞点此播放教学视频③花粉粒类型一个成熟的花粉粒即为雄配子体，有两种情况：二核花粉粒:成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）三核花粉粒:有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。三、产生花粉植株的两种途径形成原因：主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比点此播放教学视频1、材料的选择不同植物的诱导成功率不同.同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响.（一般选月季的初花期）合适的花粉发育期（单核居中期与靠

4、边期之间）2、培养基的组成（MS培养基+不同比例的植物生长调节激素）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等四、影响花药培养的主要因素注意：选择最合适的花粉发育时期:单核期，细胞核由中央移向一侧时①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎；②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难；③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，微生物少，易消毒。点此播放教学视频六、实验操作实验操作材料选取材料和消毒接种和培养（一）材料的选取②某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。①最常用的方

5、法有醋酸洋红法2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。1、从花药看：月季的初花期从花粉看：单核期从花蕾看：完全未开放的点此播放教学视频方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）花药在卡诺氏固定液中处理20min→取出，置于载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色）点此播放教学视频①醋酸洋红法染色机理醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成

6、红色。将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。②醋酸洋红的配置3、醋酸洋红法点此播放教学视频点此播放教学视频4、焙花青—铬钒法将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀①卡诺氏固定液的配制方法将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至100ml。②焙花青—铬钒溶液的配制方法点此播放教学视频（二）材料的消毒花蕾（_______）清洗吸干水分消毒2～4min冲洗3～5次浸泡约30s（__

7、____）（__________）（____________）（_______）70%酒精无菌吸水纸无菌水无菌水1%氯化汞溶液1%次氯酸钙溶液饱和漂白粉溶液1%氯化汞溶液说明：用于培养的花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。点此播放教学视频月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗点此播放教学视频（三）接种和培养1灭菌后花蕾，要在下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。3通常每瓶接种花药，温度控制在左右，。幼小植

8、株形成后才。2在剥离花药时，要尽量（否