【推荐】显微镜观察.doc

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1、显微镜观察实验一、光学显微镜的使用及人型菌类的观察一、口的与要求1、了解光学显微镜的结构和成像原理2、掌握光学显微镜的使用方法3、认识和掌握菌类代表种类的形态特征及观察方法二、实验原理光学显微镜是-种精密的光学仪器。当前使用的显微镜都是由-套透镜组成的。普通光学显微镜通常能将物体放人1500-2000倍。分辨率（可辨出两点间最小距离），公式如下：0.5X/nsina/2公式屮：入为所用光源波长；口为物镜镜口角；n为玻片与物镜间介质的折射率。根据上武，可通过减低波长、增人折射率、加人镜口角可以提高分辨力。紫外

2、线作光源的显微镜和电子显微镜就是利用短光波來提高分辨力以检视较小的物体的。数值孔径（numericalapealure简写为NA）是物镜:的主要参数，是决定物镜性能的最重要指标。数值孔径可用下式表示：NA=nsina/2镜口角a总是小于180。。因为空气的折射率为1,所以干燥物镜的数值孔径总是小于1，一般为0.05〜0.95；油浸物镜如用香柏油（折射率为1.515）浸没，则数值孔径最大可接近1.5。虽然理论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率，但实际上从透镜的制造技术看，是不可能达到这-极限的。通常在实

3、川范I韦I内，高级油浸物镜的最人数值孔径是1.4。担子菌门之平菇（Pleurotusostreatus）观察。平菇为腐生性真菌，为极普遍的食用菌，各地大量栽培。实验时取平菇子实体新鲜材料观察。其菌柄为侧生，菌盖扇形或贝壳形，在菌盖的下血是放射状的薄片为菌褶，菌褶随菌柄下延。子实层就生于菌褶的两血。将菌柄切开，可见到菌柄内疏松交织的丝状体。菌褶表面一•层排列成整齐紧密的细胞，细胞呈棒状，有长令短，其中有担子、侧丝和囊状体，这一层就是子实层。担子是单细胞，顶端具4个小梗，小梗的顶端各有1个担抱子。位于担子Z间较

4、短的细胞为侧丝。三、材料和用品显微镜、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、培养皿、烧杯、滴瓶、滴管、纱布、二甲苯、蒸懾水蘑菇、猴头、灵芝、鬼伞、马勃、人秃马勃、竹苏、鬼笔等的担子菌子实体的浸制标木。四、实验方法与步骤（一）显微镜的使川操作及注意事项：显微镜结构精密，使用时必须细心，要按下述操作步骤进行。1、观察前的准备1）拿取显微镜时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌±o2）将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可绘图；如果使用的是为双目生物显微镜，可放在正前方。

5、3）调节光照：口带光源的显微镜，可通过调节电流旋钮來调节光照强弱。4）调节光轴中心：显微镜在观察时，其光学系统小的光源、聚光器、物镜和日镜的光轴及光圈的屮心必须跟显微镜的光轴同在一直线上。2、低倍镜观察镜检任何标木都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。因为低倍镜视野较人，易于发现目标和确定检查的位置。将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标木处，用日镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢升起镜筒（或下降载物台），直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰

6、为止。用推动器移动标本片，找到合适的口的像并将它移到视野屮央进行观察（自己想想：推动器上的两个标尺是做什么用的？）。3、高倍镜观察在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。较好的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在正常情况下，高倍物镜的转换不应碰到载玻片或其上的盖玻片。在转换物镜时要从侧血观察，避免镜头与玻片相撞。然后从目镜观察，调节光照，使亮度适屮，缓慢调节粗调节旋钮，使载物台上升（或镜筒下降），直至物像出现，再用细调节旋钮调至物像清晰为止，将观察部位移至视野屮央进行观察。4、汕镜观察汕浸物镜的工作距离很短，一般

7、在0.2mm以内，并且无“弹簧装置”，因此使用油浸物镜时要特别细心，避免由于“调焦”不慎而压碎标木片并使物镜受损。使川油镜按下列步骤操作：1）先用粗调节旋钮将镜筒提升（或将载物台下降）约2cm,并将高倍锐转出。2）在玻片标木的镜检部位滴上」滴香柏油。3）从侧面注视，川粗调节旋钮将载物台缓缓地上升，（或镜筒下降），使油浸物镜浸入香柏油中，使镜头儿乎与标木接触。4）从接1=1镜内观察，放人虫「•彩光圈，上调聚光器，使光线充分照明。用粗调节旋钮将载物台徐徐下降（或镜筒上升），当出现物像一•闪后改用细调节旋钮调至最

8、清晰为止。如汕镜已离开汕血而仍未见到物象，必须再从侧血观察，重复上述操作。5）观察完毕，下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦擦镜纸蘸少许二甲苯或乙瞇酒精混合液（乙瞇2份，纯酒精3份）,擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭旷3下即可，（注意向一个方向擦拭）。6）将各部分还原：下降载物台最低处；转动物镜转换器，使物镜镜头转成八字形，再向下旋转至最低处；将调节光源亮度的旋钮最小化；关掉电源；用柔