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1、2019-2020年高中生物第十一单元现代生物科技专题第37讲基因工程课时跟踪训练测控导航表知识点题号1.基因工程的基本工具12.基因工程的基本操作程序及应用2,43.PCR技术34.蛋白质工程65.综合考查5,71.(xx·吉林三模)回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题:(1)培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体,其目的是 ,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因表达和发挥作用。 (2)构建基因表达载体时,可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的 键。 (3)组成基因表达载
2、体的单体是 。基因表达载体中的启动子是 识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过 (填过程)合成mRNA。 (4)用两种限制酶XbaⅠ和SacⅠ(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体,应选用下图中的何种Ti质粒? 。 注:图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点解析:(1)构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因表达和发挥作用。(2)DNA连接酶的作用是在DNA片段
3、之间形成磷酸二酯键将DNA片段连接起来。(3)基因表达载体的本质是DNA,其基本组成单位是脱氧核苷酸;基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过转录合成mRNA。(4)图甲中,该Ti质粒中含有限制酶XbaⅠ和SacⅠ的切割位点,且用这两种酶切割可将目的基因插入TDNA中;图乙中,该Ti质粒中不含限制酶SacⅠ的切割位点;图丙中,该Ti质粒中含有限制酶XbaⅠ和SacⅠ的切割位点,但用这两种酶切割不会将目的基因插入TDNA中;图丁中,该Ti质粒中不含限制酶XbaⅠ的
4、切割位点。答案:(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在 (2)磷酸二酯(3)脱氧核苷酸 RNA聚合酶 转录 (4)甲2.(xx·福建龙岩一模)苦荞是一种有名的经济植物,其含有的黄酮类化合物具有降血糖、血脂等功效。CHS是合成黄酮类化合物的关键酶。有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中,培育高产黄酮苦荞品系。回答下列问题:(1)过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒的酶称为 。这种酶主要有两类,一类是从T4噬菌体中分离得到的,另一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为 。 (2
5、)图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为 ,除此外还可以利用的方法有 。对过程②操作前,需先用Ca2+处理农杆菌,使其成为 细胞。 (3)检测转基因苦荞培育是否成功,不能用抗原—抗体杂交技术进行检测的原因是 ,可以比较转基因苦荞与普通苦荞的 含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定。 解析:(1)过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒需要DNA连接酶。从大肠杆菌中分离得到的DNA连接酶称为E·coliDNA连接酶。(2)将目的基因导
6、入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法,图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞采用的是农杆菌转化法;将目的基因导入微生物细胞需要采用感受态细胞法,即需先用Ca2+处理农杆菌,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。(3)转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物,故检测转基因苦荞培育是否成功,不能用抗原—抗体杂交技术进行检测;可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定。答案:(1)DNA连接酶 E·coliDNA连接酶(2)农杆菌转化法 基因枪法
7、、花粉管通道法 感受态(3)转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物 黄酮类化合物3.PCR是多聚酶链式反应的缩写,利用PCR技术可对目的基因进行扩增。请根据下面PCR反应原理示意图回答有关问题:(1)PCR的原理是 。 (2)PCR技术使DNA解链是通过 实现的,DNA的这种解链现象在一定条件下是 (填“可逆的”或“不可逆的”)。 (3)DNA解链后冷却的目的是 。 (4)当温度加热至70～75℃时,是 酶把单个脱氧核苷酸通过 键连接到引物上。如此逐渐延伸形
8、成互补链,进而使目的基因加倍。 (5)通过重复循环(3)、(4)、(5)过程,使目的基因以 形式扩增。 解析:(1)PCR的原理是DNA双链复制。(2)PCR技术通过高温加热使DNA解链,DNA的这种解链现象在一定的条件下是可逆的,即降低温度后能复性。(3)DNA解链后冷却的目的是让引物与互补DNA链相结合,形成局部双链。(4)当温度加热至70～75℃时,是热稳定DNA聚合酶把单个脱氧核苷酸通过
