拓展视野　核移植技术发展简史

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1、拓展视野核移植技术发展简史补充资料资料1：克隆猴“中中”和“华华”，是在中科院上海生物化学研究所诞生的。两个核心成员，论文的第一作者刘真，通讯作者孙强，都没有留学经历。蒲慕明院士说，这两位都有很好的机会去国外顶尖实验室的，回来就能申请“青年千人计划”，拿到很多科研经费。照刘真的说法，是留在国内反而得到了机会:“假如我去美国最好的实验室，导师是不会让一个新来的博士生做克隆猴工作的，因为20年来，全世界最好的实验室都没攻破。”资料2:“中中”和“华华”的诞生沿用了多莉的技术路线。首先是从一只猕猴（A猴）的胚胎提取成纤维细胞（供体细胞），并进行培养；然

2、后是从另一只猴子（B猴）的卵母细胞去除细胞核，形成无核的卵母细胞（受体细胞）；接着把供体细胞注（移）入去核的卵母细胞中，形成新的融合细胞；再用外源性化合物刺激这个融合的卵母细胞，从而形成囊胚和胚胎，并把胚胎植入另一只母猴，即代孕猴（C猴）的子宫中孕育，最后分娩出“中中”和“华华”。资料3：最困难的地方是，去除猴子受体卵母细胞的细胞核。对于其他动物来说，去除卵母细胞的细胞核相对容易一些，例如，小鼠的卵母细胞在普通光学显微镜下是半透明的，能比较清楚地显现细胞中的细胞核，研究人员容易进行去除细胞核的操作，因而也容易把供体细胞的细胞核移入。但是，猕猴的卵

3、母细胞的透明度很低，很难找到其中的细胞核，需要使用间断的特殊光照，才能在闪烁的光线下捕捉到隐约显身的细胞核身影，然后去除细胞核。“中中”和“华华”的创造者之一、博士后刘真花了大量的时间来训练，最后实现了在10秒内精准完成对卵母细胞的去核显微操作，而且能在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞当中。此外，如何让融合的供体细胞核与受体卵母细胞结合的新细胞形成胚胎并发育，也是一件很困难的工作。研究人员经过多次试验，采用离子霉素+6-甲基氨基嘌呤（6-DMAP）的物质来激活核移植后的卵母细胞，也就是让新融合的细胞形成囊胚（胚胎）——这种方式产生囊胚的比

4、例只有13%，要让囊胚发育为新的个体还需要产生具有内细胞团的优质囊胚.不过，更为重要的是，要让融合细胞像胚胎一样发育的根本要素在于让细胞重新编程，因为尽管融合细胞中的体细胞是猴胎成纤维细胞，也已是定性的体细胞，这就需要让体细胞去甲基化、乙酰化才能重新编程。无论是遗传物质DNA、RNA，还是蛋白质，其分子表面都有甲基、乙酰基等的基团，以修饰DNA等，所以要去掉这些修饰才能重启和完成细胞的重编程。资料4:自上世纪90年代起，各国加大投入，实验动物的使用量呈现上升趋势。由于灵长类动物的大脑结构、功能，与人类相似，不少实验需要用到猴子。根据欧盟和美国农业

5、部的数据，美国一年大概要用到6.5万只实验用猴，欧盟这一数字为7000只。一部分猴子是人工繁衍，另一部分依靠从非洲、亚洲进口。“克隆猴是伦理上的重大进展，可以大大减少世界范围内对实验动物的使用量。”蒲慕明院士说，由于每只猴子的遗传背景不同，所以只能通过增加猴子数量，筛选关键基因，最终确定药物是否有用。资料5：“（克隆猴的诞生）意味着中国将率先建立起可有效模拟人类疾病的动物模型。”孙强说，利用克隆技术，未来可在一年时间内，培育大批遗传背景相同的模型猴。这既能满足脑疾病和脑高级认知功能研究的迫切需要，又可广泛应用于新药测试。这就再也不用为了完成几个药

6、物的检测，每年牺牲数万只猴子。孙强介绍，如果实验对象的遗传背景不同，“实验组”和“对照组”的说服力就不够强。传统医药实验大量采用小鼠，很大程度上是因为鼠类可通过快速近亲繁殖，培育出大量非常相似的小鼠。但由于小鼠和人类相差太远，针对小鼠研发的药物在人体检测时大都无效或有副作用。据了解，这是目前绝大多数脑疾病研究无法取得突破的一个主要原因。中科院神经所所长蒲慕明院士说，克隆猴的成功，将为脑疾病、免疫缺陷、肿瘤、代谢等疾病的机理研究、干预、诊治带来前所未有的光明前景。“这是世界生命科学领域近年来的重大突破。”他说。资料6：克隆技术的突破还有望加强濒危动

7、物的保护。“例如，金丝猴是濒危珍稀保护动物。掌握了克隆猴技术，我们只要能够找到合适的母体接受金丝猴克隆胚胎，就可以为世界各地动物园提供来自中国的珍贵金丝猴。”蒲慕明说。资料7：“多莉”羊是一头绵羊，1996年诞生，2003年因关节炎引起肺部感染，“安乐死”了，它活了不到7年。普通绵羊通常能活11到12年，“多莉”英年早逝，它出生时的伦理争议正逐渐冷却，此时再度急剧升温:这是不是克隆惹的祸，是不是克隆技术的缺陷害了它，让它早衰、早夭?不过“多莉”之后，2007年，又有4头克隆羊降生，它们的名字叫黛比、丹妮丝、戴安娜和黛西，合称“诺丁汉多莉”，区别于

8、“老多莉”降生地爱丁堡。用于克隆它们的组织样品，来源与克隆多莉的一样，都是那一头6岁大的母绵羊的体细胞，所以它们的基因完全相同。“诺丁汉