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《脆性X综合征的产前基因筛查与诊断》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、脆性X综合征的产前基因筛查与诊断作者：杨丹彤贾颐舫吴爱华张爱东【摘要】目的对脆性X综合征进行产前基因筛查与诊断。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对32例孕妇及其胎儿的脆性X基因(CGG)n重复序列进行检测，同时采用PCR扩增牙幼基因对胎儿性别进行鉴定。结果在32例孕妇及其胎儿中，检出1例孕妇为前突变携带者,1例男性胎儿为脆性X综合征患者。结论采用PCR扩增脆性X基因(CGG)n重复序列，结合扩增牙幼基因进行性别鉴定，可对脆性X综合征进行产前筛查与诊断。【关键词】脆性X综合征；聚合酶链反应；牙幼基因；产前诊断Prenatalscr
2、eeninganddiagnosisforfragileXsyndromeYANGDantong,JIAYifang,WUAihua,ctal.ShandongProvincialKeyLaboratoryforImprovingBirthOutcomeTechniqueShandongProvincialFamilyPlanningScieneeandTechnologyInstitute,Jinan,Shandong250002,China[Abstract]ObjectiveToscreenanddiagnosefragileXsyndromepr
3、enatallybyPCR・MethodsTheCGGrepeatregionintheFMR1genewasamplifiedbyPCRandwasdetectedbyPAGEin32pregnantwomenandtheirfetusesandthefetalsexwasidentifiedbytheamplificationofamelogeningene・ResultsOnepremutationcarrierandonemalefetuswithfragileXsyndromeweredetectedfrom32pregnantwomenand
4、theirfetuses・ConclusionAmplificationoftheCGGrepeatregionintheFMR1geneandtheamelogeningenebyPCRcanbeappliedforprenatalscreeninganddiagnosisforfragileXsyndrome・[Keywords]FragileXsyndrome;Amelogeningene;Prenatalscreening;Prenataldiagnosis脆性X综合征(fragileXsyndrome,FXS)是一种X连锁遗传病，是危害儿童智力
5、发育导致儿童智力低下的主要遗传病之一，该病的临床诊断与产前诊断一直备受关注。1991年Verkerk等[1]发现了FXS相关致病基因FMR1,提出FMR1基因内(CGG)n重复序列的不稳定性扩展及其上游CpG岛的异常甲基化是导致该病的分子基础。此后，检测FMR1基因(CGG)n重复序列及甲基化状况的分子生物学方法开始用于FXS的诊断与产前诊断。本研究建立了稳定的聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增FMR1基因的(CGG)n重复序列作为FXS的筛查与诊断方法，结合PCR扩增牙幼基因(amelogenin)作为性别的诊断
6、方法，用于FXS的产前筛查与诊断，报告如下。对象与方法一、对象2007年1月〜2007年10月来本所优生遗传门诊进行羊水染色体检查的无FXS家族史孕妇30例，另有2例孕妇系FXS家系成员,其中1例己生有1个FXS男性患儿。32例孕妇均为单胎妊娠。孕妇于孕18〜22周抽取羊水，留用5ml,3000r/min离心10min后弃上清，细胞沉淀-20°C保存备用。同时取孕妇外周血5ml,0.lmol/LEDTA抗凝，-20°C保存备用。二、方法1.基因组DNA提取：采用基因组DNA提取试剂盒(Takara公司)，按说明提取。2.PCR扩增FMR1基因(CGG)n
7、重复序列：参照文献[2],在FMR1基因5'非翻译区(CGG)n重复序列两侧设计合成一对引物(由上海生工生物技术有限公司合成)，序列如下。FMRR5'AGCCCCGCACTTCCACCACCAGCTCCTCCA3'PCR反应总体积为25Pl,含1XPCRbuffer,2UGoldenTaqDNA聚合酶(ABI公司),12.5%二甲亚矶(DMSO),12.5pmol/L引物，10mmol/LdNTP,50ng/L基因组DNA。反应条件为：98°C预变性10min,97°C变性60s,61°C退火60s,72°C延伸120s,共35个循环，最后72C延伸5m
8、irio1.PCR扩增牙幼基因：选择XY同源牙幼基因(amelogenin)第一
