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1、2003年3月色谱Vol.21No.2March2003ChineseJournalofChromatography121~125毛细管等电聚焦电泳技术进展杨春,姬磊,张维冰,张玉奎(中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心,辽宁大连116011)摘要:介绍了毛细管等电聚焦电泳(CIEF)技术的发展和现状,特别对载体两性电解质、柱内表面处理和检测技术等方面的最新进展加以系统评述,并且对CIEF的定性能力、峰容量、重现性及其在生命科学方面的应用前景进行了讨论。引用文献59篇。关键词:毛细管等电聚焦;进展;综述中图
2、分类号:O658文献标识码:A文章编号:1000-8713(2003)02-0121-05AdvancesinCapillaryIsoelectricFocusingElectrophoresisYANGChun,JILei,ZHANGWeibing,ZHANGYukui(NationalChromatographicR.&A.Center,DalianInstituteofChemicalPhysics,TheChineseAcademyofSciences,Dalian116011,China)Abstract:T
3、hecurrentstatusandlatestadvancesincapillaryisoelectricfocusingelectrophoresis(CIEF)arereviewedfrom59recentresearcharticles.Evaluationsandcommentsoncarrieram-pholytes(CAs),conditioningorcoatingsofcapillaryinnersurface,anddetectionmethodsarereport-ed.Inaddition,th
4、easpectsofqualitativeanalysis,peakcapacity,reproducibilityinCIEF,andthefu-tureapplicationsofCIEFinlifescience,aredescribed.Keywords:capillaryisoelectricfocusingelectrophoresis;advance;review近年来毛细管等电聚焦电泳(CIEF)作为一种[1~6]1载体两性电解质特殊的微分离技术得到了较大的发展,尤其在蛋白质、抗体、临床样品等生命活性物
5、质的分离分析CIEF实验使用的载体两性电解质(CAs)一般方面已得到越来越广泛的应用。CIEF最早由是由多胺化合物(如:四乙烯四胺、四乙烯五胺)和[6]Hjertn等根据平板等电聚焦电泳(IEF)的原理建A-,B-不饱和羧酸(如:丙烯酸)随机聚合制得的混合立。它是将带有两性基团的样品、载体两性电解质、物,其中包含有数以千计的不同等电点的化合物,足缓冲剂和辅助添加剂的混合物注入毛细管内,当在以满足所需要的pH梯度。对于要求得到更加连毛细管两端加上直流电压时,载体两性电解质可以续、均匀的pH梯度的场合,如测定pI值,可以选
6、择[11,12]在管内形成一定范围的pH梯度,样品组分依据其混合CAs。所带电性向阴极或阳极泳动,柱内pH值与该组分目前有多种品牌的宽等电点范围(pH3~10,2的等电点(pI)相同时,溶质分子的净电荷为零,宏~11)或窄等电点范围(pH6~8,9~11)的CAs供观上该组分将聚集在该点不再进一步迁移,达到使应,这些产品大多直接取于平板IEF,紫外吸收较复杂样品中各组分分离的目的。强,实验中通常只能选择280nm波长进行紫外检CIEF与IEF相比具有耗时短、样品用量少、易测,导致检测灵敏度较214nm处大大降低,从而限
7、[13]于自动化等诸多优点,与毛细管区带电泳、毛细管电制了其应用范围。因此有人尝试不用CAs的动力学色谱等其他分离模式相比也具有峰容量大、CIEF技术,即通过电解纯水分别产生氢离子和氢氧对两性溶质的选择性好等特点。随着CIEF应用范根离子,再利用电迁移的方法把氢离子和氢氧根离围的不断拓宽,关于CIEF的理论研究包括计算机子引入毛细管中形成pH梯度,并且向阳极池中加[7~10]模拟都取得很大进步,在CIEF分离分析技术入酸、向阴极池中加入碱来巩固pH梯度,实现了在[13~15]方面也取得了长足的发展。纯水中分离蛋白质。采
8、用动态pH梯度、无收稿日期:2002-06-18作者简介:杨春,博士研究生,研究方向为多维电泳.通讯联系人:张玉奎,研究员,博士生导师,E-mail:ykzhang@dicp.ac.cn,Tel/Fax:(0411)3693427.基金项目:国家/9730项目:人类重大疾病蛋白组学研究(编号001CB510202).#122#色谱
