五味子藤茎中木脂素类保肝作用研究工作总结报告

五味子藤茎中木脂素类保肝作用研究工作总结报告

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1、浙江省中医药科技计划项目工作总结报告计划编号:201XYA014项目名称:五味子藤茎中木脂素类保肝作用研究承担单位:浙江医学高等专科学校项目负责人:姚莹起止年月:201X年10月至201X年10月一、项目工作总结“五味子藤茎屮木脂素类保肝作用研究”为浙江省中医药管理局青年资助项0(项目编号:201XYA014),本项目的研究自201X年10月开始,至2010年10月结束,己顺利完成项目合同书所规定的研究内容,并取得了预期的研究成果。现总结如下:五味子藤茎为木兰科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的T•燥藤茎。近年来化学研究结

2、果表明:五味子藤茎屮含有与五味子果实相同的木脂素成分,三年生茎藤中五味子甲素、五味子乙素的含量及二者之和已与五味子果实中所含的成分接近,四年牛以上的五味子茎藤中的木脂素含量均高于五味子果实。从五味子甲素与五味子乙素的比值来看,五味子藤茎中五味子甲素所占的比例要高于五味子果实,五味子乙素所占的比例低于五味子果实。近年来由于野生五味子资源逐年减少,而市场需求持续增长,导致五味子药材价格不断上涨。五味子无性繁殖能力较强,营养生长吒盛,但不易结果,人工栽培和野生护养需要剪枝,因此五味子藤茎资源极为丰富。根据现有的研究结果,我们认为三年生以上五味子藤茎完全可以替代五味子果实作

3、为提取五味子木脂素的原料,但若要以五味子藤茎入药,则述需要作大量的化学、药理、毒理研究。本项目拟采用超临界CO?流体萃取、RP-HPLC等现代分离分析技术,以五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲作为指标成分,测定五味子藤茎中木脂素的含量。采用四氯化碳造小鼠肝损伤模型,通过测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清白蛋白(ALB)、肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)等反映肝功能及脂质过氧化的指标,研究五味子藤茎屮木脂素对化学毒物引起的动物肝细胞损伤的保护作用。通过五味子藤茎中木脂素抗动物实验性

4、肝损伤的作用机制研究,为五味子藤茎入五味子药用部位提供化学及药理研究资料。本项目完成了五味子藤茎、果实中木脂素类成分的超临界提取,五味子果实、藤茎的萃取率分别为10.57%和6.17%,收率高且无毒无污染。本项目以五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲作为指标成分,通过考察流动相、流速、检测波长、柱温等分析条件,并进行了流动相组成、配比、pH等色谱条件的优化,建立了五味子藤茎、果实中木脂素类成分的HPLC含量测定方法,比较五味子果实、藤茎超临界萃取物中木脂素的含量,发现藤茎中五味子甲素的含量略高于果实,五味子醇甲的含量明显高于果实;而果实屮五味子乙素的含量则明显高于藤茎

5、。这一结果与北五味子果实、藤茎药材的薄层色谱结果一致,五味子藤茎中五味子甲素所占的比例要高于五味子果实,五味子乙素所占的比例低于五味子果实。本项目在测定了五味子藤茎、果实超临界提取物中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲含量的基础上,同时根据五味子藤茎超临界提取物的急性毒性试验结果,确定了药效试验的给药剂量,以及高、中、低剂量的设置,完成了五味子藤茎中木脂素对急性肝损伤小鼠保护作用的研究,研究结果显示:五味子藤茎中木脂素对CCL’致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用,高剂量组保肝效果与联苯双酯阳性对照组、五味子果实组作用相当,五味子藤茎中、低剂量组由于药物剂量低,作用不

6、明显,从得到的各项检测数据及肝脏组织学变化来看,五味子藤茎高、中、低剂量组之间存在量效关系,其保肝作用机制与其抗脂质过氧化作用有关。根据项目合同,成果提供为2篇学术论文,目前本项目3篇学术论文:“五味子藤茎的生药学研究”已于2010年1月在《中华中医药学刊》发表;“HPLC测定北五味子果实、藤茎超临界萃取物中木脂素的含量”将于2010年11月在《屮国药学杂志》发表;“五味子藤茎中木脂素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用”已被《中国临床药理学与治疗学》杂志录用,将于近期发表。二、项目实施技术报告已按照项目合同书的计划,完成合同规定的研究内容和相关技术指标,完成了五味

7、子藤茎、果实中木脂素类成分的超临界提取,建立了五味子藤茎、果实中木脂素类成分的IIPLC含量测定方法,完成了五味子藤茎屮木脂素对急性肝损伤小鼠保护作用的研究。撰写了课题总结,3篇论文“五味子藤茎的生药学研究”已于2010年1月在《中华中医药学刊》发表;“HPLC测定北五味子果实、藤茎超临界萃取物中木脂素的含量”将于2010年11月在《中国药学杂志》发表;“五味子藤茎中木脂素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用”已被《中国临床药理学与治疗学》杂志录用,将于近期发表。项目执行情况具体如下:<-)五味子藤茎的生药学研究五味子藤茎为木兰科植物五味子Schisandrac

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