《不同生姜提取物的》PPT课件

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1、不同生姜提取物的急性毒性及体外抑癌作用研究Thestudyofacutetoxicityandinvitroanticancereffectofginger’sextract申请答辩人：黄玉艾指导教师：卢静2009年6月5日内容试验结果及结论试验方法试验中的关键技术生姜提取物的制备背景介绍前人对生姜的药理生理活性已研究的比较多，生姜能维持抗氧化酶系(SOD、过氧化氢酶、GSH过氧化物酶)的活性，显著降低大鼠的脂质过氧化反应，降低血液中丙二醛（MDA）含量从而具有抗氧化活性。生姜还含有较多的挥发油，可以抑制人体对胆固醇的吸收，防止肝脏和血清胆固醇的蓄积。生姜预

2、防和控制癌症的发生和进展一直是全世界积极探索的课题。前人研究的生姜抗肿瘤原理有抑制肿瘤组织中血管的生成作用、通过免疫调节抗肿瘤、对癌细胞转移的影响、通过细胞毒作用抗肿瘤等。抗肿瘤作用研究相对较少，研究时间也相对较短。至今没有人用MTT法从对肿瘤细胞毒性的方面对生姜粗提物的抗肿瘤活性进行研究。生姜中某些有效成分抗癌作用研究进展试验内容制备生姜提取物急性毒性试验细胞毒性试验抗肿瘤试验生姜提取物的制备鲜姜干燥切片Text姜粉急性毒性试验7.12%7.67%细胞相关试验姜粉的制备姜粉50℃水浴3h生姜醇提物生姜水提物10倍70%乙醇煮煎3次过滤浓缩10倍水水提法和醇

3、提法生姜水提物和生姜醇提物浓度急性毒性试验1.66g/ml（姜粉）细胞相关试验1g/ml（姜粉）试验中的关键技术动物实验的灌胃技术细胞培养技术细胞复苏细胞传代培养细胞冻存急性毒性试验GB15193-03《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行最大耐受量试验试验原理细胞毒性以及抗肿瘤试验MTT法试验方法急性毒性试验急性毒性试验选取健康小鼠60只，每组10只，为雄性空白对照组、雄性水提组、雄性醇提组、雌性空白对照组、雌性生姜水提组和雌性生姜醇提组。采用小鼠经口灌胃，按体重给药，0.2ml/10g，灌胃两次。基于MTT法的细胞试验细胞毒性试验HL-7702人正常肝细

4、胞系抗肿瘤试验BEL-7404人肝癌细胞系SMMC-7721人肝癌细胞系接种用胰蛋白酶消化，制成细胞悬液，然后以每孔100微升接种于96孔板，CO2培养箱内孵育24小时染毒每孔加入40微升的受试物，作用24h后加MTT再加入10微升的MTT，4h显色弃上清，每孔加入150μl的DMSO，震荡，溶解甲儹颗粒，于酶标仪上读取490nm处的吸光度值MTT法操作步骤试验结果灌胃后性别对小鼠长势的影响在急性毒性试验中，灌胃一周后，小鼠无中毒和死亡现象，通过分析灌胃一周后体重增长的数值，我们可以看到：空白组之间差异不显著，雄性组与雌性组间的差异也不显著（P＞0.01），

5、但是与对应的空白组之间的差异显著。灌胃后提取方法对小鼠长势的影响浓度水提物醇提物水提物醇提物g/ml（姜粉）OD值OD值抑制率抑制率0.003160.28140.30200.25%00.010.27730.27551.72%2.35%0.03160.27410.27502.84%2.53%0.10.27040.26634.16%5.63%0.3160.11510.200959.20%28.80%10.04100.016785.47%94.09%生姜水提物和生姜醇提物各剂量组OD值及抑制率在细胞毒性试验中以10为底0.5的对数为组距，两种提取物均设置六个剂量组

6、，作用于人正常肝细胞系。加入生理盐水的阴性对照组细胞的状态加入生理盐水的阴性对照组的细胞生长状态良好，结构清晰，边缘整齐，细胞外围有光晕，折光性好不同剂量的生姜水提物作用后细胞的生长状态不同剂量的生姜醇提物作用后细胞的生长状态浓度水提组醇提组水提组醇提组g/ml（姜粉）OD值OD值抑制率抑制率0.003160.28140.30200.25%00.010.27730.27551.72%2.35%0.03160.27410.27502.84%2.53%0.10.27040.26634.16%5.63%0.3160.11510.200959.20%28.80%10

7、.04100.016785.47%94.09%生姜提取物各剂量组OD值及抑制率低浓度组的细胞状态与阴性对照组相似，毒性很小，低于0.1g/ml的抑制率小于5.63%抗肿瘤试验浓度设置及实验结果受试物名称代码浓度以姜粉计BELOD均值SMMCOD均值BEL抑制率SMMC抑制率生姜水提物1WEG10.1g/ml0.0310.00368.46292.711生姜水提物2WEG20.01g/ml0.0830.01314.74469.679生姜醇提物1EEG10.1g/ml0.0270.00972.30878.134生姜醇提物2EEG20.01g/ml0.0370.01

8、461.92366.764环磷酰胺CTX0.01g/