常氧和低氧条件下%2c人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞增殖及分化的影响

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。∥哆?_i：≥：一。，一、oji：：0．．鼍．研究生签名：恕吃蚺导师签章：彳碜幽二级学院领导≤章：≯ot1年石其

2、日研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行

3、的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：分弋心导师签孚：钐彩朗切ff年厂月／日目录㈣洲㈣㈣Ⅲ㈨㈣⋯m灿IY1900529中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文常氧和低氧条件下，人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞增殖及分化的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5日lJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．i⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．5材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．23综述HIF．1、VEGF、KDR及Flt．1对肿瘤血管形成的调控⋯⋯⋯⋯．25致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．32个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33中文摘要常氧和低氧条件下，人喉鳞癌细胞分泌的血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞增殖及分化的影响摘要目的：头颈肿瘤同其它大多数实体肿瘤一样，瘤体内的部分细胞处于缺氧环境之中。实体肿瘤持续性生长和转移需要有新

6、生血管的形成，以新生血管为靶点对实体肿瘤进行生物学治疗已成为近些年来新的研究热点。本实验利用人喉鳞癌(H印．2)细胞和人脐静脉内皮细胞(HumanUmbilicalVeinEndotheliaCell，HUVEC)，研究在简单模拟实体瘤内部常氧和低氧条件(HypoxiaInducibleFactor1alpha，HIF．1伐)下，与喉鳞癌血管生成相关的三个指标VEGF(vascularendothelialgrowthf．actor)，F1t-1(vascularendothelialgrowthf-actorrecept

7、or1)，KDR(Vascularendothelialgro、Ⅳthfactorreceptor2)的表达，探讨各个蛋白在喉鳞癌转移过程中的确切作用，为头颈肿瘤的治疗奠定实验基础。方法：1Hep．2细胞培养于含10％新生小牛血清、青霉素(100U／mL)、链霉素(100“∥mL)的RPMI．1640培养基中，常规传代培养，置于37℃，5％C02，20％02(常氧)或37℃，5％C02，2％02，93％N2(低氧)的培养箱中。2待Hep．2细胞进入对数生长期后，将细胞分为2组：A组(常氧24h组)、B组(低氧24h组)。收

8、集各组细胞培养上清，用于刺激人脐静脉内皮细胞生长。免疫细胞化学染色检测人脐静脉内皮细胞Flt．1、l①R蛋白表达。MTT法检测人脐静脉内皮细胞的增殖情况。3待H印．2细胞进入对数生长期后，将细胞分为2组：A组(常氧3h组、常氧6h组、常氧12h组、常氧24h组、常氧48h组)、B组(低氧3h组、低氧6h组、低氧12h组、低氧24h组、低氧48h组)。收集各组细胞及其培养上清，ELISA法检测各组细胞及其培养上清VEGF蛋白的表达。结果：中文摘要1免疫细胞化学结果：Flt．1、I①R蛋白主要位于人脐静脉内皮细胞胞浆和胞核，呈

9、棕黄色，且低氧48h上清刺激组高于常氧48h上清刺激组，差异有统计学意义(尸