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时间:2019-06-24
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1、细胞电泳实验原理在电场作用下,液体介质中的质点与介质间的相对运动称为电泳。细胞表面具有一定的电荷(通常为负电),将细胞制备成悬浮液,使其单个游离的细胞分散于等浸的介质中,在外加电场作用下,细胞在电泳室内发生运动,这种现象称为细胞电泳。实验目的初步掌握细胞电泳的原理和观察方法细胞表面电荷电泳速度,ζ电位细胞生理状态细胞表面电荷是影响红细胞和血管内皮细胞粘附的极为重要的因素。正常情况下,因红细胞膜表面带负电菏,使红细胞间相互排斥,彼此分散悬浮于血浆中;病理情况下,血浆性质发生改变,如球蛋白、纤维蛋白原增加,白蛋白减少等,可致红细胞表面负电荷减少,红细胞相互聚集而沉降加速。已知红细胞
2、表面所带负电荷主要是由细胞表面的搪蛋白或糖脂上面的N一乙酰神经氨酸决定的(唾液酸的一种)。实验用品一、器材:1、显微细胞电泳系统2、吸水纸3、2ml注射器二、材料:蛙血红细胞1%蛙全血[用85%NaCl-肝素钠(4-5IU/ml)湿润的注射器从蛙心脏抽取蛙血,用85%NaCl-肝素钠(4-5IU/ml)溶液稀释蛙血,即作为细胞介质]主机极向转换开关电泳槽显微镜(摄像头)显微细胞电泳系统显微观察电泳槽玻璃小室显微观察电泳槽固定架观察窗(易碎)安放玻璃小室加样电泳电泳结束,取出玻璃小室实验方法与步骤一)样品准备和仪器开启二)固定玻璃小室和加样三)观察电泳二)固定玻璃小室1、取出电泳
3、槽中的玻璃小室,注意保护观察窗。2、先将玻璃小室的一端对准电泳槽架一侧的胶块中间,用适当的力推压,将另一端的4/5留在胶块里,1/5露出在外。3、用注射器针头吸取样品插入玻璃小室的内部加样。三)观察电泳1、把显微观察电泳槽平放于显微镜的载物台,观察窗对准镜头中心。2、调节镜头的位置,找到细胞。3、用鼠标控制电的连接,观察细胞的运动。
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