DB51T 1081-2010 饲料中赭曲霉毒素A的测定 高效液相色谱法

《DB51T 1081-2010 饲料中赭曲霉毒素A的测定 高效液相色谱法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS备案号：28171-2010DB51四川省地方标准DB51/T1081—2010饲料中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法DeterminationofochratoxinAinfeedsHigh-performanceliquidchromatography2010-06-01发布2010-07-01实施四川省质量技术监督局发布DB51/T1081-2010目次前言…………………………………………………………………………………………………………II1范围…………………………………………………………………………………………………………12

2、规范性引用文件……………………………………………………………………………………………13原理…………………………………………………………………………………………………………14试剂和溶液…………………………………………………………………………………………………15仪器与设备…………………………………………………………………………………………………26试样制备……………………………………………………………………………………………………27分析步骤……………………………………………………………………………………………………28结果计算……………

3、………………………………………………………………………………………29精密度………………………………………………………………………………………………………3附录A…………………………………………………………………………………………………………4IDB51/T1081-2010前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。本标准由四川省饲料工作总站负责起草。本标准起草人：柏凡、赵立军、李云、高庆军、甄阳光、张静。IIDB51/T1081-2010饲料中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法1范

4、围本标准规定了测定饲料中赭曲霉毒素A的含量的高效液相色谱法(HPLC)。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及饲料原料的测定。本标准中赭曲霉毒素A的检出限为30µg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样经甲醇-水提取，离心、过滤后，取滤液经过免疫亲和柱净化，浓缩，用高效液相色谱仪-荧光检测

5、器检测，外标法计算赭曲霉毒素A的含量。4试剂和溶液除特殊说明外，所有试剂均为分析纯，色谱用水符合GB/T6682一级用水的规定。4.1甲醇：分析纯、色谱纯。4.2氯化钠。4.3氯化钾。4.4磷酸钠。4.5磷酸氢二钠。4.6磷酸二氢钾。4.7提取液：甲醇+水=80+20（体积比）。4.8吐温-20。4.9磷酸盐缓冲液（PBS）：称取8.0g氯化钠、1.44g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾，溶于1000mL水，用盐酸或氢氧化钠溶液调pH至7.0。4.10清洗缓冲液：0.1mL吐温-20溶于1LPBS（4.9）缓冲液中。4.11赭

6、曲霉毒素A标准品：含量大于98%。4.11.1标准贮备液：精密称取10mg赭曲霉毒素A标准品，用乙腈溶解、定容至100mL，此贮备液浓度为100µg/mL，置于冰箱中2～8℃保存，有效期6个月。4.11.2标准工作溶液：分别准确移取赭曲霉毒素A贮备液，用流动相配制成标准工作溶液：0.001µg/mL，0.01µg/mL，0.1µg/mL，0.5µg/mL，1.0µg/mL，5.0µg/mL。置于冰箱中2～8℃保存，有效期1个月。注意：注1:凡接触赭曲霉毒素A的容器，需浸入4%次氯酸钠（NaOCl）溶液，放置半天后清洗备用。注2:为了安全，分

7、析人员操作时须带上医用乳胶手套，在通风橱内操作。1DB51/T1081-20104.11.3赭曲霉毒素免疫亲和柱。5仪器与设备5.1分析天平：感量0.1mg。5.2超声波清洗器。5.3离心机：转速为5000r/min以上。5.4超纯水处理器。5.5涡旋混合器。5.6高效液相色谱仪：配备荧光检测器。5.7氮吹仪。5.80.45µm滤膜。6试样制备按GB/T14699.1规定采集试样后，按GB/T20195规定，选取具有代表性的实验室样品1kg，四分法缩减分取200g左右，粉碎过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1试样溶液的制备7

8、.1.1提取称取20g试样(精确至0.01g)于锥形瓶中，加入2g氯化钠（4.2），50mL提取液（4.7），超声提取20min，离心，取上清液过滤，准确量取滤液5.0mL，加入