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1、!""#年$月色谱$%&’!%(%’&!"#!""#!"#$%&%’()*$+,(-!"*(.+/(0*+1"2&#’(&#)从猪血中分离纯化高纯度的猪血红蛋白周+勃，+边六交（西北大学生命科学院国家微检测系统工程技术研究中心，陕西西安)*""%-）摘要：为了从猪血中分离纯化高纯度的猪血红蛋白，建立了通过超滤、5*4*)6782"9%17:"1;:&%<离子交换色谱和6782"=7>?))$凝胶排阻色谱三步法制备高纯度猪血红蛋白的方法，并通过十二烷基磺酸钠)聚丙烯酰胺凝胶电泳（656)@4?*）、高效凝胶排阻色谱和反相高效液相色谱方法
2、，对纯化后的猪血红蛋白进行了鉴定。经三步分离纯化后，猪血红蛋白的纯度大于--A，含量为*.&!#BCD。关键词：超滤；阴离子交换色谱；凝胶排阻色谱；猪血红蛋白；分离；纯化中图分类号：E%$#++文献标识码：4++文章编号：*""")#)*&（!""#）"&)"&#’)"’++栏目类别：研究论文!"#$%$&’()$)*#+%’,’-$&’()(,#(%-’)"."/(01(2’),%(/#(%-’)"21((*FGEHI%，IJ4(D,/0,"%（!"##$%$&’($)*’$+*$，,"-./0$1.2+’3$-1’.4，,5.’"
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6、++血红蛋白（27+%B&%-,.，G-）是存在于动物血红白；李涛等使用热敏法纯化人脐带血血红蛋白；［)］细胞中具有生物传氧功能的重要蛋白质。多年来，路秀玲等利用膨胀床吸附纯化牛血红蛋白。研以血红蛋白为基础的血液代用品研究一直是国内外究表明，G-类血液替代品的副作用，如肾毒性及某［#］医学界研究的重点。该代用品较好地解决了输血血些细胞因子的诱导产生、血栓的形成等，皆与G-源短缺及血源污染等问题，某些产品目前已经完成溶液中所含细胞膜碎片或G-以外的杂蛋白等有［*/&］或部分完成了临床实验，取得了突破性的进展。关。因此，快速、有效、大量地
7、制备高纯度血红蛋白因此对原料血红蛋白的要求也将越来越高，需要探至关重要。索更为有效的血红蛋白纯化方法。++本实验从新鲜猪血中提取的猪血红蛋白是用于++目前血红蛋白分离纯化的方法很多，如离心透制备一种血液代用品———戊二醛聚合血红蛋白，因析吸附等。近年来，国内亦见到少量血红蛋白分离而要求猪血红蛋白需具超高纯度。上述已报道的分［’］纯化方法的报道。樊晶等应用萃取)超滤两步法离工艺要么纯度达不到要求，要么活性损失比较大，［$］从过期人血中提纯人血红蛋白；李军等从新鲜猪很难满足用作血液代用品基质的血红蛋白的要求。血中通过微滤和弱阴离子交换色谱
8、法提纯猪血红蛋为了得到高纯度且活性损失小的猪血红蛋白，经过收稿日期：!""))"#)*’第一作者：周+勃，硕士研究生’通讯联系人：边六交，教授’*)+",&：-,".&,/0,"%,1%2/’3%+’基金项目：国家“#%
