烟草赤星病拮抗细菌筛选及其16S+rDNA+PCR-RFLP分析

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1、浙江大学硕士学位论文烟草赤星病拮抗细菌筛选及其16SrDNAPCR—RFLP分析姓名：杨波申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：郭泽建;方敦煌20050501单位代码：!Q33§学生学号：2Q21§Q22烟草赤星病拮抗细菌筛选及其16SrDNAPCR--RFLP分析论文评阅人：郑重教授、∞导(姓名、职称、'9-位)堑些厶：王土塑越!．型蕾盟谢关林教授、博导逝丛：厶：兰!生趔照丕!皿筮盟柴荣耀副研究员塑些鱼盎盟堕丝堡当笪墨：■!堑答辩委员会主席：徐同教授、博导(姓名、职称、单位)逝迪厶堂生翅丝盔丛煎盛答辩委员会成员：林福呈教授、博导(姓名、职称、单位)逝i．I=厶!：i

2、三生塑壁莶!l!I窭逝陈卫良副教授、硕导逝i』厶堂尘垫』§盔!!Ⅱ煎逝郭泽建教授、博导!E固丝些拦型也丞本研究承蒙云南省科技“十五”攻关项目(2001NG08)国家烟草专卖局招标课题项目(110200202001)云南省烟草专卖局重点科研计划资助项目(01A06、03A02)资助致谢本论文是在导师郭泽建教授、方敦煌副研究员的悉心指导下完成的。两位导师扎实的植病专业知识、严谨的治学态度、刻苦的工作作风、勤俭的生活方式、把握学科前沿的敏锐洞察力、无私奉献的精神品格和对科研事业的执着都将是学生受益终身。在此对导师们的精心培养和谆谆教诲表示由衷的感谢。本研究工作主要在云南烟草科学研

3、究所植保室和高新技术研究室完成，得到了邓云龙副所长、邵丽老师大力支持，实验室邓建华、吴兴富、祝明亮、宋春满、李云华、李文正、李应金、杨树军、陈学军、肖炳光、夏振远、宗会、王东丹、肖燕等诸位老师也给予了大量无私的支持和帮助，在此一并表示晟真诚的谢意!感谢实验室李景光、习j星燕、白江兰等实验员、云南农业大学烟草学院李宝乐同学在部分实验中给予的协助!还要感谢在云南认识的朋友们，感谢他们在实验及生活上给予的关心和帮助，使我在云南期间度过了一段难忘的美好时光。在本研究完成过程中，张炳欣教授、陈卫良副教授、梁五生副教授给予我热情无私的帮助；本实验室的邬亚文、白洋、赵佩欧、吴学龙、吴坤陆

4、、王海华、谢科、郝中娜、窦彩虹、陈旭君等同学的关心和帮助；此外在实验过程中到了郭维、潘卫锋、杨本超、杨松、张慧丽、陈亮等同学的大力帮助和支持。在此一并表达我对他们最诚挚的谢意!最后特别感谢多年来支持我、鼓励我的家人，你们在生活上给予我无微不至的关怀．从而使我能够一心完成学业。杨波2005年5月于华家池第一章文献综述1．1烟草赤星病的发生、流行、危害及防治现状烟草赤星病是由半知菌亚门、链格孢属真菌(AlternariaalterrratafFries、Keisslar)侵染引致的叶斑病，具有潜育期短、流行速度快的特点。此病自1892年首次在美国由Ellis和Everhave发

5、现以来，曾数次给世界烟草生产带来巨大的经济损失(Lucas等，1975)。1931年烟草赤星病在津巴布韦广泛传播后，1956年此病又在美国北卡罗来纳州突然爆发流行，造成2100万美元的严重损失(Shew等，1990；Stavely等，1970)。1963年，此病害在世界造成的损失达总产值的O．5％。同年此病在日本烟区也严重发生危害。此外，哥伦比亚、阿根廷、委内瑞拉、澳大利亚、加拿大等国家也陆续发生。1916年我国首次在北京附近发现有烟草赤星病的发生。20世纪60年代，山东、河南烟区曾大流行，损失很大，尤其是1967年该病曾使山东烤烟均价下降一个等级。20世纪80年代初各烟主

6、产区赤星病病情又有大幅度上升的趋势，成为我国烟草上发生范围最广、危害最重的叶部病害。1989～1991的3年间，河南省烟草平均每年因赤星病造成的损失为2300万元。1992年是特大流行年，黄淮烟区损失很大。近年来，安徽、贵州、陕西、辽宁等省的赤星病也有所发展。影响烟草赤星病发生的因子很多，主要包括：(1)烟株生长阶段的抗病性；(2)自然环境条件(温、湿度)与烟草赤星病发生流行的关系；(3)烟草品种与赤星病发生流行的关系；(4)菌源量与赤星病发生流行的关系；(5)烟草栽培管理技术与赤星病流行的关系。目前，烟草赤星病的防治方法主要有以下几种：(1)．药剂防治由于目前在生产上可种

7、植的优质抗病品种较少，药剂防治仍是控制赤星病的重要措施。目前可选用的药剂种类不多，应充分考虑药剂残留和卷烟卫生等安全问题，根据病情适时喷旌，以控制突发性的病害。赤星病是下部靠近地面的脚叶先发病，然后在脚叶上积累大量的病菌，有了适于病害流行的条件，再向中上部的叶片垂直扩散。因此，必须是在下部叶零星发病的时候，尽快采取药剂防治。烟株下部叶进入成熟阶段时，在雨前、雨后或湿度大、露水重、雾期长时，应及时喷施内吸性高效、低残留的药剂进行防治。6月份赤星病初发期，开始对烟株喷洒10％宝丽安(多抗霉素)可湿性粉剂800-1000