猪源金黄色葡萄球菌的毒力基因分布，生物被膜形成和凝血致病性的研究

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1、硕士学位论文猪源金黄色葡萄球菌的毒力基因分布，生物被膜形成和凝血致病性的研究作者姓名张阳学科专业食品科学与工程指导教师闫鹤副研究员所在学院食品科学与工程论文提交日期2018年06月TheDistributionofvirulencegenes,biofilmformationandcoagulationpathogenicityofporcineStaphylococcusaureusADissertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：ZhangYangSupe

2、rvisor：Prof.YanHeSouthChinaUniversityofTechnologyGuangzhou，China分类号：TS207.7学校代号：10561学号：201520120876华南理工大学硕士学位论文猪源金黄色葡萄球菌的毒力基因分布，生物被膜形成和凝血致病性的研究作者姓名：张阳指导教师姓名、职称：闫鹤副研究员申请学位级别：工学硕士学科专业名称：食品科学与工程研究方向：食品微生物学论文提交日期：2018年06月01日论文答辩日期：2018年06月05日学位授予单位：华南理工大学学位授予日期：

3、年月日答辩委员会成员：主席：李汴生委员：张立彦、余保宁、阮征、闫鹤*基金项目：“十三五”国家重点研发计划（2016YFD0500606）；广东省科技计划项目（2014A020214001、2016A020219001）。华南理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承

4、担。作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华南理工大学。学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅（除在保密期内的保密论文外）；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。本学位论文属于：□保密，在年解密后适用本授权书。□不保密，同意在校园网上发布，供校内师生和与学校有共享协议

5、的单位浏览；同意将本人学位论文提交中国学术期刊(光盘版)电子杂志社全文出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，传播学位论文的全部或部分内容。(请在以上相应方框内打“√”)作者签名：日期：指导教师签名：日期作者联系电话：电子邮箱：联系地址(含邮编)：摘要金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)是一种重要的食源性病原微生物，能够引发食源疾病的爆发和葡萄球菌食物中毒，同时也是一种常见的人畜共患病病原菌，能够引起人和动物感染多种疾病。本研究以生猪养殖场采集的猪鼻拭纸和环境样本、屠宰场和

6、猪肉终端消费市场中采集的生鲜猪肉样本分离的130株S.aureus为研究对象，利用PCR方法研究S.aureus毒力基因（肠毒素基因，溶血素基因、杀白细胞素基因pvl，中毒性休克综合症基因tst和粘附及生物被膜基因）的分布状况和agr型别的多样性；采用结晶紫染色法研究菌株生物被膜形成能力强弱；采用血浆凝固酶实验研究菌株对不同动物宿主的凝血致病作用并利用PCR法研究菌株中血浆凝固酶基因的分布情况，同时利用统计学方法对实验结果进行相关性分析，结果如下：(1)130株S.aureus中，约94.6%(123/130)S

7、.aureus携带有肠毒素基因，以seb的检出率最高，达60.0%。生猪养殖场分离S.aureus和屠宰场及终端市场分离S.aureus的肠毒素基因分布有明显差异，传统肠毒素基因(sea,seb,sec,sed,see)主要分布在屠宰场及终端市场生鲜猪肉分离株中，表明生鲜猪肉分离S.aureus有较大可能引发潜在的传统型食物中毒危害；而新型肠毒素基因主要分布在生猪养殖场分离S.aureus中，表明生猪养殖场分离S.aureus可能作为新型危害食品安全的风险因子。此外，溶血素基因hla,hlb,hld的检出率分别为

8、95.4%，100.0%，98.5%。脱皮毒素基因eta和etb分别只在一株菌中有检出，且均来源于屠宰车间分离株。杀白细胞素基因pvl和中毒性休克综合症基因tst在所有实验菌株中均未检出。(2)130株S.aureus中，约83.8%(109/130)的菌株为agr阳性。“生猪养殖场-屠宰场-终端市场”中不同来源菌株agr型别表现不一。生猪养殖场分离株均为agrIV型，而