家蚕组织蛋白酶基因家族结构分析及功能初探

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1、主要缩略词表缩略词英文全称中文译名AmpORFbDEDllALBODPCRrpmSDSTAETETrislPTGX—gaIESTBisdATPdCTPdGTPdTTPdNTPTaqTEMEDAmpicillinopenreadingframesbasepairEthylenediaminetetraceticacidLuria-BertaimediumOpticaldensityPolymerasechainreactionrevolutionperminuteSodiumdodecylsulfataTris-aceticacid-EDTA1Yis-EDTAbu施rTdshydroxymeth

2、ylaminomethanelsopropyl-B-D-thiogalactoside5一brom-4-chloro-3·indolyl-B·D·galacropyranosideExpressedsequencetagN．N'-MethylenebisacrylamideDeoxyadenosinetdphospbateDeoxycytidinetriphosphateDeoxyguanosinetriphosphateDepxythymidinetriphosphateanyofthefourdeoxynucleotidetriphosphateThermusaquaticusN，N'N’

3、，N’--tetramethylethylendiamine氨苄青霉素开放阅读框碱基对乙二氨四乙酸LB培养基光密度聚合酶链式反应每分钟转数十二烷基磺酸钠Tris．乙酸．EDTAEDTA缓冲液三羟基甲氨基甲烷异丙基．B．D．硫代半乳糖营5．溴．4．氯-3．吲哚．B．半乳糖苷表达序列标签甲叉双丙烯酰胺脱氧腺营三磷酸脱氧胞苷j磷酸脱氧鸟苷二二磷酸脱氧胸苷j磷酸四种脱氧核苷三磷酸中的任何一种水生栖热苗N，N，N’，N’一四甲基乙、胺独创性声明X937568学位论文题目．_．．一一塞叠塑塑蛋自醒基因塞基结掏金堑及功能塑拯本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，

4、除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的趼究成果，也不包含为获得西南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者：邑落签字日期：∥‘年厂月，。日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家宵关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究主院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫漪等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论

5、文：口不保密，口保密期限至年月止)。学位论文作者签名移e噜签字日期：缸．，6年广月，。日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：导师签名：／名幺勿一签字日期：矽6年尹月r。日电话邮编：中空捅要摘要昆虫体内存在多种蛋白酶，主要发挥蛋白水解功能，如昆虫卵内蛋白酶在昆虫胚胎发育过程中降解卵黄蛋白质，供给胚胎发育必需的氨基酸，对胚胎发育具有重要的作用。另外蛋白酶对昆虫的发育变态具有十分重要的作用，因此倍受瞩目。昆虫体内的组织蛋白酶已有很多报道，从20世纪60年代至今，己对家蚕、聚蝇、棉铃虫、蝗虫和蚊子等数种昆虫的蛋白酶进行了研究，所报道的蛋白酶大多属于半胱氨酸、丝氨酸和天冬氨酸蛋自酶类。家蚕是重要

6、的经济昆虫和模式生物，2003年，中国家蚕基因组框架图的闻世给我们提供了大最重要信息，虽然已有部分家蚕蛋白酶作了报道，但是家蚕中蛋白酶具体的种类，除了报道的蛋白酶另外否还有新的蛋白酶，蛋白酶在家蚕中的组织分布和发育时期的表达情况，以及蛋白酶在家蚕中的具体生理功能是怎样的，这些问题引导着我们继续对家蚕蛋白酶进行研究。本论文在家蚕基因组框架图的基础上，采用生物信息学分析方法，利用家蚕基因组数据库羊llEST数据库，广泛调查了存在于家蚕中的组织蛋白酶的种类以及在家蚕中的组织分布和不同发育阶段的表达情况，另外对新的组织蛋白酶D基因进行了克隆和生物学信息分析；并运用RNAi实验方法初步探索组织蛋白酶B在

7、家蚕中的功能。本论文的研究工作主要分为以下儿部分：i．根据基因组数据预测：家蚕包括13个蛋白酶基因(编号：Bmb028908、Bmb029117、BⅢb011691、Bmb024796，Bmb011691、Bmb024796、Bmb028908，Bmb013888，Bmb008297．Bmb029952、Bmb015815，Bmb020327，Bmb032550)，分为组织蛋白酶B、D、L、0、、