急性髓系白血病细胞VCAM1、CD34、CD117的表达研究

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1、中山大学硕士学位论文急性懿系白血病细胞VC肌1、CD34和CDl17的表达研究专业内科学硕士研究生庞文正导师侯丽君摘要急性白血病(atueleukemiaAL)是一组异质性恶性克隆性疾病，系造血干细胞或祖细胞突变引起的造血系统恶性肿瘤，发病时大量的白血病细胞在骨髓中增殖，抑制正常造血，并广泛浸润其他器官和组织。研究发现在白血病细胞不断增殖、浸润的过程中，粘附分子(adhesionmolecules)发挥了重要作用，而血管细胞粘附分子(vascularcelladhesionmoleculel，VCAM．1)作为其中的一员，

2、可介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质之间的粘附，并可选择性的促进单个核细胞的粘附。以往研究表明：VCAM．1主要来源于非造血细胞，如骨髓基质细胞、内皮细胞、组织巨噬细胞及树突状细胞，最后研究发现在急性白血病初诊患者血液中VCAM．1的水平异常升高，推测这种高水平的VCAM．1可能与白血病细胞自身表达的VLA4相结合，通过激活P13K依赖的信号途径，在白血病的增殖、分化、迁移、浸润中发挥重要作用，有研究证实，白血病细胞存在自分泌功能，可以分泌一些细胞因子及粘附因子促进自身的增值和浸润。国外学者研究发现在某些类型的急性髓系白血病

3、细胞可以表达VCAM-1，引起人们的关注。CD34是一种分子量为105-．一120KD的糖蛋白，是干细胞、祖细胞的标志，它是～种阶段特异性抗原。最近有研究发现，白血病细胞同样具有CD34抗原的表达，且在M0、M1、M2等分化程度较差的白血病类型当中CD34多有高表达，临床常出现髓外浸润表现，而且CD34+过度表达也可能是不良预后因素之一。CDl17是c·kit受体(c-kitreceptor,c．“tR)膜外区分子表面抗原标志，其配体为干细胞因子(SCF)，SCF是重要的造血生长因子，同其他细胞因子协同作用可刺激造血干／祖

4、细胞的增殖和分化。研究表明CDl17主要表达在髓系幼稚细胞上，正常的骨髓造血干细胞、定向祖细胞上CDll7表达率仅为4％。但在急性髓系白血病细胞上存在CDl17高表达，多出现在M0、M1分化程度较低的急性髓系白血病类型，并且也中山大学硕士学位论文易出现髓外浸润表现，似与CD34有良好的相关性。在CD34与CDl17表达的急性髓系白血病细胞上，VCAM一1表达如何，是否具有相关性，目前尚不明确，本实验通过对急性髓系白血病细胞VCAM．1、CD34及CDll7的表达研究，探讨其白血病细胞自身VCAM．1、CD34、CDll7的

5、表达情况以及VCAM．1、CD34、CDll7---者之间的相关性，进一步了解VCAM．1的来源，并试图为急性髓系白血病的预后判断提供新的检测指标。材料和方法1、材料1．1标本的来源：16例白血病骨髓标本均来自我院血液科住院期间的急性髓系白血病患者(经患者同意后)。1．2采集时间：2008．4至U2009．3。1．3采集时期：16例骨髓标本采集于初诊时，2骨髓标本例采集于急性髓系白血病复发时。1．4符合条件：以上患者诊断均符合2007．8张之南、沈悌主编的第三版《血液病诊断及疗效标准》关于急性白血病的诊断标准及复发、难治的

6、诊断标准。2、实验步骤和方法取符合条件的患者骨髓液2ml(肝素钠抗凝20IU／rId)，并分别在PE标记的VCAM．1、CD34、CDl17荧光单抗20uI中NA骨髓单个核细胞106个，室温避光15分钟。然后溶血法去除标本中的红细胞，离心、去上清。加入固定液500ul后上机检测。3、统计方法采用SPSS13软件分析白血病细胞自身VCAM．1、CD34、CDll7的表达，结果用Means--I：Std表示，均数的组间比较采用秩和检验或T检验(根据数据是否符合正态分布决定)，组间相关分析采用秩和检验Spearman等级相关或P

7、earson相关分析，P<0．05为差异有统计学意义。结果1．急性髓系白血病细胞VCAM．1表达呈低水平，与对照组比较无统计学差异(Z=．1．843P=0．06)。Ⅱ中山大学硕士学位论文2．急性髓系白血病细胞CD34、CDll7表达呈高水平，与对照组比较有统计学差异(tcD34=4．09PCD34----0．01；tCDll7=3．82PCDll7=0．045)。3．急性髓系白血病难治组与非难治组比较，CD34表达升高，有统计学差异(ZCD34=·2．475PCD34----'0．01)；CDI17表达无统计学差异(tCD

8、IIT=I．95pCDllT=0．73)。4．急性髓系白血病细胞VCAM．1的表达同自身CDl17表达水平成正相关(r=0．51P=-0．04)。5．急性髓系白血病细胞VCAM．1表达与自身CD34表达无相关性(r：O．15P=0．58)。6．急性髓系白血病白细胞CD34与CDll7表达成正相关(r--