公母畜生殖器官观察

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1、本文由【中文word文档库】www.wordwendang.com搜集整理。中文word文档库免费提供海量教学资料、行业资料、范文模板、应用文书、考试学习和社会经济等word文档动物繁殖学实验指导(2009)湖南文理学院动物科学教研室二〇〇九年二月十八日24实验一 羊胚胎移植技术操作规程一、目的要求掌握羊胚胎移植的手术采卵、检胚、手术移植的基本操作规程。二、实训内容供受体的驱虫及营养调控、供受体的同期发情、供体的超数排卵、供体的配种、供受体的发情登记、冲胚液的配制、供体的采胚、检胚与胚胎鉴定、胚胎的冷冻、胚胎移植三、用品清单(见附件)四、技术

2、要求本规程规定了绵羊胚胎移植技术操作的基本原则、要求和方法。本规程适用于绵羊胚胎移植技术推广应用的规范化操作。山羊胚胎移植操作也可参照本规程。(一)超数排卵1.供体羊的选择1.1供体羊应符合品种标准,具有较高生产性能和遗传育种价值。1.2供体羊的年龄一般为2.5~7岁,青年羊为18月龄。体格健壮,无遗传及传染性疾病。1.3繁殖机能正常,经产母羊没有空胎史。2.供体羊的饲养管理2.1良好的营养状况是保持正常繁殖机能的必要条件。应在优质牧草的草场放牧,补充高蛋白饲料、维生素和矿物质,并供给盐和清洁的饮水,做到合理饲养,精心管理。2.2供体羊在采卵

3、前后应保证良好的饲管条件,不得任意变换草料和管理程序,在配种季节前开始补饲,保持中等以上体膘。3.超数排卵时间3.1绵羊胚胎移植的超数排卵,应在每年绵羊最佳繁殖季节进行。3.2供体羊超数排卵开始处理的时间,应在自然发情或诱导发情的情期第12~13d进行。4.超数排卵处理4.1促卵泡素(FSH)减量处理法供体羊在发情后的12~13d开始肌肉注射FSH,早晚各一次,间隔12h分3d减量注射。使用国产FSH总剂量为200~300单位。供体羊一般在开始注射后的第4d表现发情,发情后立即静脉注射(或肌注)促黄体素(LH)75~100iu,或促性腺激素释

4、放激素的类似物50~75ug,LH的剂量一般为FSH的1/3。超排剂量及激素比例可根据不同厂家和批号稍作调整。4.2孕马血清促性腺激素(PMSG)处理法在发情周期的第12~13d,一次肌注PMSGl500~25001U(国际单位),发情后18~24h肌注等量的抗PMSG。4.3发情鉴定和人工授精24FSH注射完毕,随即每天早晚用试情公羊(带试情布或结扎输精管)进行试情。发情供体羊每日上下午各配种一次,直至发情结束。应增加每次输精的有效精子数。(二)采卵1.采卵时间以发情日为0d,在6~7.5d或2~3d用手术法分别从子宫或输卵管回收卵。2.手

5、术室设置及要求采卵及胚胎移植需在专门的手术室内进行,手术室要求洁净明亮,光线充足、无尘,地面用水泥或砖铺成。配备照明用电。室内温度保持在20~25℃。在手术室内设专门套间,作为胚胎操作室。手术室定期用3%~5%煤酚皂(来苏尔)或石炭酸溶液喷洒消毒,手术前用紫外灯照射1~2h,在手术过程中不应随意开启门窗。3.器械、冲卵液等物品的准备3.1手术用的金属器械放在含0.5%亚硫酸钠(作为防诱剂)的0.1%新洁尔灭液中浸泡30min(min)或在来苏尔液中浸泡1h,使用前用灭菌盐水冲洗,以除去化学试剂的毒性、腐蚀性和气味。3.2玻璃器皿、敷料和创巾等

6、物品按规程要求进行消毒。3.4麻醉药、消毒药和抗菌素等药物,酒精棉、碘酒棉等物品备齐。4.供体羊准备供体羊手术前应停食24~48h,可供给适量饮水(手术前12h停水)。4.1供体羊的保定和麻醉供体羊仰放在手术保定架上,四肢固定。肌肉注射2%静松灵0.5ml,局部用0.5%盐酸普鲁卡因麻醉。4.2手术部位及其消毒手术部位一般选择乳房前腹中线部(在两条乳静脉之间)或后肢股内侧鼠鼷部。用电剪或毛剪在术部剪毛,应剪净毛茬,分别用清水和消毒液清洗术部,然后涂以2%~4%的碘酒,待干后再用70%~75%的酒精棉脱碘。先盖大创巾,再将灭菌巾盖于手术部位,使

7、预定的切口暴露在创巾开口的中部。5.术者的准备术者应将指甲剪短,并锉光滑,用指刷、肥皂清洗,特别注意刷洗指缝,再进行消毒。术者需穿清洁手术服,戴工作帽和口罩。手臂消毒:在两个盆内各盛温热的洁水(已煮沸过)3000~4000ml,加入氨水5~7ml,配成0.5%的氨水,术者将手指尖到肘部先后在两盆氨水中各浸泡2min,洗后用消毒毛巾或纱布擦干,按手向肘的顺序擦。然后再将手臂置于0.1%的新洁尔灭液中浸洗约5min,或用70%~75%酒精棉球擦拭两次。双手消毒后,要保持拱手姿势,避免与未消毒过的物品接触,一旦接触,即应重新消毒。6.手术操作的基本

8、要求手术操作要细心、谨慎、熟练,否则直接影响冲卵效果和创口愈合及供体羊繁殖机能的恢复。6.1作切口注意要点切口常用直线形,作切口时注意以下六点:6.1.1避开较大血

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