基于金、银纳米材料的新型免疫学检测技术的建立与评价

《基于金、银纳米材料的新型免疫学检测技术的建立与评价》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：基于金、银纳米材料的新型免疫学检测技术的建立与评价Establishmentandevaluationofnanogoldandnanosilver-basednovelimmunoassays作者姓名：梁家杰指导教师姓名及学位、职称：唐勇副研究员学科、专业名称：理学、免疫学学位类型：学术学位论文提交日期：论文答辩日期：答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：摘要目的：利用制备的金、银纳米材料，建立简便、快速的高灵敏免疫学检测方法，摸索可产业化的生产工艺，为新型快速检测技术的设计和开发提供方法学基础。方法：利用制备的金纳米颗粒和荧光材料建立新型

2、的荧光猝灭免疫层析试纸条（fluorescencequenchingimmunochromatographicstrip,FQ-ICS）用于重金属镉离子2+（cadmium,Cd）的检测，并对其生产工艺条件进行优化，同时为了简化FQ-ICS结果读取方式，制作低成本的基于手机联用的便携式试纸条读卡仪，并对其稳定性和可用性进行了评价。利用制备的银纳米颗粒偶联拉曼探针4-MBA并表面增强其拉曼信号，将该复合物标记抗体，建立基于银纳米颗粒表面增强拉曼光谱的免疫层析试纸条（SurfaceEnhanced3+RamanScattering-basedICS,SERS-ICS）用于水样中的重金属铬离子（

3、chromium,Cr）的检测，将检测结果与电感耦合等离子体质谱（inductivelycoupledplasmamassspectrometry,ICP-MS）进行符合性比较，同时对试纸条的特异性和重复性进行评价。利用在SERS-ICS构建的过程中发现的银纳米颗粒的氧化现象，优化条件，建立基于聚集银纳米颗粒表面增强拉曼光谱的等离子体ELISA（SERS-plasmonicELISA）方法，用于超灵敏检测前列腺癌特异抗原（Prostaticsepcificantigen,PSA）和瘦肉精莱克多巴胺（Ractopamine,Rac），将该方法检测临床血清样本，并与时间分辨免疫荧光技术（Tim

4、eResolvedFluorescenceImmunoassay,TRFIAs）的结果进行比较。为了降低成本和方便肉眼观察，利用制备的三角银纳米片材料，建立基于过氧化氢（H2O2）腐蚀三角银纳米片的等离子体ELISA（TriangularAgNPRs-plasmonicELISA），用于高灵敏检测PSA，并对该方法进行可行性验证、灵敏度和特异性评价，将该方法检测临床血清样本，并与TRFIAs的结果进行比较。利用金纳米颗粒的表面等离子共振现象，建立简便的纳米金-适配体的比色传感器用于检测PSA，初步优化该方法的反应条件后进行灵敏度和特异性评价，并检测临床血清样本，与TRFIAs的结果进行比较

5、，同时制备了低成本的基于手机联用的便携式比色仪，并对其可用性进行评价。2+2+结果：建立了可检测水样中的Cd的FQ-ICS，检测信号与Cd浓度呈正相关，灵敏度比胶体金免疫层析试纸条高15倍以上，可检测实际环境水样，经生产工艺优化后，该试纸条可保存一年以上，且批间差异性不显著。制作的便携式读卡设备对同一试纸条的拍照无3+明显差异，且可用于胶体金试纸条和荧光的试纸条。建立的SERS-ICS检测Cr灵敏度达I-5-6-2到10ng/mL，线性范围在10ng/mL-10ng/mL，特异性和重复性良好，检测实际水样，结果与ICP-MS的结果无显著差异。建立的SERS-plasmonicELISA检测

6、PSA和Rac的灵-9-6敏度达到10ng/mL和10ng/mL，检测临床血清样品中的PSA结果与TRFIAs结果无显著差异。建立的TriangularAgNPRs-plasmonicELISA检测PSA灵敏度达到4.1fg/mL，线性范-6围在1fg/mL-10fg/mL，可用肉眼观察结果，特异性良好，检测临床血清样品中的PSA结果与TRFIAs结果无显著差异。建立的纳米金-适配体的比色传感器检测PSA灵敏度为2ng/mL，线性范围在5ng/mL-20ng/mL，特异性良好，检测临床血清样品中的PSA结果与TRFIAs结果无显著差异。制作的便携式比色仪对纳米金-适配体的比色传感器进行结果

7、的读取，初步验证该方法可行。结论：本研究建立了高灵敏正读的FQ-ICS并优化了其生产工艺流程，试纸条保存期长，批间差异小。制作的便携式读卡仪稳定可靠，适合即时检测和床旁诊断。建立了高灵敏、3+快速检测Cr的SERS-ICS，可检测实际水样。建立了超灵敏检测PSA和Rac的SERS-plasmonicELISA，可用于临床血清样品检测。建立了高灵敏检测PSA的TriangularAgNPRs-plasmonicELISA，