原发性干燥综合征外周血pbmc及唇腺组织eb病毒表达的研究

原发性干燥综合征外周血pbmc及唇腺组织eb病毒表达的研究

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1、分类号:R593.24密级:不保密UDC:612学校代码:11065博士专业学位论文原发性干燥综合征外周血PBMC及唇腺组织EB病毒表达的研究李华指导教师王吉波教授学科专业名称内科学(风湿病学)论文提交日期2015年10月15日论文答辩日期2015年11月20日答辩委员会主席李兴福教授原发性干燥综合征外周血PBMC及唇腺组织EB病毒表达的研究中文摘要目的:原发性干燥综合征(PrimarySjögren’sSyndrome,pSS)是以侵犯唾液腺、泪腺等外分泌腺体,以大量淋巴细胞浸润为特征的自身免疫性疾病。多项研究发现,pSS的发病与EB病毒(Epstein-Barrvirus,EB

2、V)的感染相关。EB病毒核抗原-1(Epstein-BarrNuclearAntigen-1,EBNA-1)和EB病毒核抗原-2(Epstein-BarrNuclearAntigen-2,EBNA-2)是EBV潜伏期表达的核心抗原。通过检测pSS患者外周血单个核细胞(Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)EBVDNA拷贝数,以及测定pSS患者唇腺组织中EBNA-1和EBNA-2的表达情况,探讨EBV与pSS发病的关系。方法:应用Real-time荧光定量PCR定量检测32例pSS患者与28例正常对照PBMC中EBVDNA拷贝数。通过免疫组化的方法测

3、定32例pSS患者及6例正常唇腺组织中EBNA-1和EBNA-2的表达情况(以细胞胞浆、胞核中出现棕黄色颗粒状物质为阳性)。结果:①pSS患者EB病毒DNA检测阳性率100%(32/32),对照组EB病毒DNA检测阳性率89.2%(25/28),经检验,差异无统计学意义(P>0.05)。②32例pSS患者EB病毒DNA拷贝数均值为26.2±10.85copies/μg,28例对照组EB病毒DNA拷贝数均值为8.6±5.21copies/μg,经检验,患者组EB病毒DNA拷贝数均值明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。③32例pSS患者临床表现与EB病毒DNA拷贝数比较

4、显示,腮腺肿大组较非腮腺肿大组EB病毒DNA拷贝数差异有统计学意义(P<0.05)。32例pSS患者实验室检查结果与EBV-DNA之间的相关性分析显示,IgG与病毒DNA拷贝数呈正相关(p<0.05)。④EBNA-1和EBNA-2在部分pSS患者唇腺组织浸润的淋巴细胞,唇腺导管上皮细胞中可见阳性表达,而对照组唇腺组织未见阳性表达。pSS唇腺组织中EBNA-1的阳性率为68.8%(22/32),EBNA-2的阳性表达率62.5%(20/32),较正常对照组比较均有显著统计学意义(P<0.05)。⑤EBNA-1在pSS唇腺组织中阳性和阴性的患者在临床表现和实验室检查方面无明显差异性(P

5、>0.05)。EBNA-2在pSS唇腺组织中阳性和阴性的患者在临床表现和实验室检查方面无明显差异性(P>0.05)。结论:①EBV复制可能参与pSS的发病。②pSS腮腺肿大的患者提示可能EBV复制活跃,加重发病。③高IgG提示与EBV复制活跃相关。④EBNA-1、EBNA-2可能通过参与EBV感染而与pSS的发病相关。博士研究生:李华(风湿病专业)指导教师:王吉波教授【关键词】原发性干燥综合征;PBMC;唇腺;EB病毒TheresearchoftheexpressionofEBvirusinPBMCandsalivaryglandsofpatientswithPrimarySjög

6、ren'sSyndromeAbstractOBJECTIVE:PrimarySjögren’sSyndrome(pSS)isachronicautoimmunediseaseinvolvinglacrimalgland,salivaryglandandotherexocrineglands.Itischaracterizedbyalargenumberoflymphocyticinfiltration.AlotofresearchhaverevealedthatthepathogenesisofpSSisrelatedtotheinfectionofEpstein-Barrviru

7、s(EBV).Epstein-BarrNuclearAntigen-1(EBNA-1)andEpstein-BarrNuclearAntigen-2(EBNA-2)arecoreantigenswhichexpressinEBVlatency.BymeasuringtheEBVDNAcopiesinPBMCofpSSanddetectingtheexpressionofEBNA-1andEBNA-2inlabialglandofpatientswithpSS,expl

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