严重药疹反应相关分子标志物hla-b5801和hla-b1502检测方法的建立及应用

《严重药疹反应相关分子标志物hla-b5801和hla-b1502检测方法的建立及应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、、、．分类号：７学校代码：１０６９７Ｑ，＇？＇：０１２２０８９６密级：公开学号：２？‘４？八八ｆｔＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｙｆｉ５士字位论文＇ＯＮＭＡＳＴＥＲＳＤＩＳＳＥＲ／ＴＡＴＩ？、，Ｍ．＇？？．．Ａ－Ｂ＊５８严重药療反应相关分子标志物ＨＬ：０１知ＨＬＡ－Ｂ＊１５：似检测方法的建立及应用．ｉ：．ｖ，■—■，，‘‘？学科名称：生物化学与分子生物学作者：康星指导老师：陈超教授西北大学学位评定委员会二—０五年西北大学学位论文知识产权声明书本人完全了解西北大学关于收集、保存

2、、使用学位论文的规定。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后适用本声明。学位论文作者鮮：条ｆ指导教师签名：？年曰月／月Ｚ／曰西北大学学位论文独创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致

3、谢的地方外，本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：．ｇ＞月／日／产，摘要目前已有大量的研究表明，人类白细胞抗原（ＨＬＡ）基因与多种药物不良反应有密＊＂＊－５？切的相关性。其中５＜？／＾／／／／＾！２，针对＾２＾４＿和份：１５等位基因，在服用别嘿呤醇药＊－５８物后出现的严重不良反应患者中，１００％东南亚地区的患者中存在ＨＬＡＢ：０１等包基因；而在服用卡马西平药物后出现严重不良反应的患者中

4、，至少７５％的东南亚地区的患者中存在等位基因；此外，在未出现不良反应的患者中（耐受人群）和＊正常对照组中携带率大约为－１５％和２０％ＨＬＡＢ５８：０１，其；在使用这两种药物后，機＊－１Ｓ和ＨＬＡＢ：０２的个体较未携带这两种等位基因的个体出现严重毒副作用的机率显著增加一。因此，在服用别噪呤醇和卡马西平药物之前，国际权威的些相关治疗指南大都＊？－５８１于高危人群推荐进行ＨＬＡＢ：０似等位基因的检测，和，以判断是否属以有效降低由该药物引起的严重不良反应。＊－＊－５８因此，为了满足临床及科研中检测ＨＬＡＢ：０１和ＨＬＡＢ１５：０２等位基因的迫切需求一，建立种稳定性好、灵

5、敏度高、操作简便且髙通量的检测方法至关重要。目前，已有多种检测ＨＬＡ－Ｂ等位基因的检测方法，但其中多数方法易污染、操作繁琐或者成本很高一，难以商品化或者普遍应用于临床。本研究建立并优化了种基于等位基因特异＊＊－－－性聚合酶链式反应（ＡＳＰＣＲ）和多重实时ＰＣＲ技术检测ＨＬＡＢ５８：０１和ＨＬＡＢ１５：０２等位基因的方法。该方法操作简便、结果容易判读，且重复性好，还可以达到较高的灵。敏度和通量，适宜在临床检测及科研中应用基于本研究建立的检测方法，我们检测了４个民族（汉族、布依族、藏族、维族）“的全血基因组ＤＮＡ样本３５０例－ＳＳＰ和ＨＬＡ等位基因分型，并使用传统的Ｐ

6、ＣＲ检测的金”ＰＣＲ－ＳＢＴ方法对标准其中１００例样本进行验证。本研究所建立的检测方法得到的结果一＊－与另外两种方法所得到的检测结果完全致，且和Ｉ／ＬＡＢＪ５：０２在布依族人群中的分布频率显著高于其他三个民族一（１７％和１６％）。另外，目前只有篇文献一＊ＯＲＳｒｓ９２－：０报道，在日本人群中，ＰＳ１Ｃ１基因的个ＳＮＰ位点６３７２６与ＨＬＡＢ５８１等？位基因完全连锁Ｓ－ａｎｅｒ，因而，在本研究中，我们利用等位基因特异性ＰＣＲ（ＡＰＣＲ）和Ｓｇ一＊３７２６－测序进步证明了ｒｓ９２６在中国人群中与ＨＬＡＢ５８：０１等位基因不存在连锁关系。由此可以看出，由于核昔酸多态性

7、的分布频率在不同地区的多态性，ＳＮＰ位点与ＨＬＡ等位基因的连锁关系还需针对不同人群、不同地区来进行有针对性的研究。＊－－Ｂ：ＨＬＡ１５：０２ＳＣＡＲｓＰＣＲＡＳＰＣＲ关键词，，多重实时，ｉＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄａｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｓｅｖｅｒｅｄｍｐｐ＊＊－－５８０１ＨＬＡ－Ｂｒｅａｃｔｉｏｎｒｅｌａｔ