枣和酸枣田间愈伤组织途径芽再生技术优化及其在多倍体诱变中的应用

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1、AGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI全日制硕士专业学位（毕业）论文f-•；,*.i'f.'枣和酸枣田间愈伤组织途径芽再生技术优化及其在多倍体诱变中的应用学位申请人：王利虎指导教师；刘孟军教授刘平研究员学位名称：农业推广硕士研究领域：园艺授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月八日分类号：S665.1单位代码：10086密级：公开学号：20139110634枣和酸枣田间愈伤组织途径芽再生技术优化及其在多倍体诱变中的应用OptimizationofInVivoBudRegenerationTechniquevi

2、aCallusandItsApplicationinPolyploidyInductioninChineseJujubeandSourJujube学位申请人：王利虎指导教师：刘孟军教授刘平研究员学位名称：农业推广硕士研究领域：园艺授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月八日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同

3、志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字FI期：p/t年〈月ZR关于论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。木人授权河北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者毕业后去向电邮i£:,M:工作单位：通讯地址：摘要本研究以116个枣基因型和3个酸枣类型为试

4、材，在田间条件下对影响枝条截面愈伤组织形成和芽再生的相关因素以及秋水仙素处理次数对多倍体的诱变效果进行了研究，优化了田间愈伤组织途径芽再生技术体系，并应用于枣和酸枣多倍体诱导，获得了9个多倍体材料。主要研究结果如下：1.基因型对愈伤组织诱导有很大影响。在119个基因型中，出愈伤的基因型共113个，占供试总量的94.95%。根据愈伤组织的诱导从易到难将供试基因型分为5类。A类（75%＜出愈率≤100%）占供试基因型的56.30%；B类（50%＜出愈率≤75%）占24.37%；C类（25%＜出愈率≤50%）占10.92%；D类（0＜出愈率

5、≤25%）占3.36%；E类（出愈率为0）占5.05%。2.基因型对芽再生能力亦有很大影响。在119个基因型中，截面愈伤诱导出芽的基因型共96个，占供试总量的80.67%。根据芽再生从易到难将基因型分为5类。I类（平均单枝截面出芽数＞3.0）占供试基因型的20.17%；II类（2.0＜平均单枝截面出芽数≤3.0）占10.08%；III类（1.0＜平均单枝截面出芽数≤2.0）占16.81%；Ⅳ类（0＜平均单枝截面出芽数为≤1.0）占33.61%；Ⅴ类（平均单枝截面出芽数为0）占19.33%。3.对出愈率与平均单枝截面出芽数进行了相关性分

6、析，结果表明，二者相关性不显著；同时发现，愈伤组织等级对出芽数有一定的影响，随着愈伤量的提高，单枝截面愈伤出芽数有一个升高的过程，5级愈伤的单枝出芽数较多，可达2.86个，愈伤组织环超过截面半径的1/2的6级愈伤组织芽再生能力稍微有所下降。4.枝条粗度在一定程度上影响出芽能力，直径为1.4-1.9cm的枝条比较容易芽再生，30d后的平均单枝截面出芽数可达2个，显著高于粗度为0.9-1.4cm和1.9-2.4cm枝条的出芽数；树冠上部枝条的芽再生能力显著高于中下部枝条；枝条水平位置和角度对芽再生能力没有显著影响。5.秋水仙素处理次数对多

7、倍体诱变效果有明显影响。与0.05%秋水仙素处理1次相比，处理2次时，各基因型的出愈率平均下降24.01%，平均单枝截面出芽数减少1.61个，平均诱变率下降2.52%。6.优化了田间愈伤组织途径芽再生技术体系，具体的操作流程是：在5月中旬或者下旬，选择位于树体上部、直立、茎粗1.4~1.9cm的健壮枝条进行截枝，用1.5ml-1TDZ+2.0mg·L-1AgNO诱导剂（4.0mg·L3）处理截面形成层24h，之后截面用湿泥保湿，直到芽体长达2cm左右。7.共获得9个多倍体材料，其中四倍体种质3个，分别来自于乐金1号、运城婆婆枣和宁夏长

8、枣；三倍体种质2个，分别来自于骏枣和磨盘枣；二、四混倍体4个，分别来自于茶壶枣、骏枣、太谷铃铃枣和洪赵小枣。关键词：枣树；酸枣；活体；愈伤组织；四倍体；三倍体OptimizationofInVivoBudRegenera