her2蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及曲妥珠单抗对卵巢癌skov3细胞的影响

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122370HebciMedicalUniversity硕士学位论文科学学位HER2蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及曲妥珠单抗对卵巢癌SKOV3细胞的影响研究生：肖喜云导师：张辉教授专业：妇产科学二级学院：第四医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。木学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所何。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公幵和使用。凡发表与学位论文:]•:要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均

2、归河北医科大学所有。杏则，承担相应法律责任。研究生签名导师签章:二级学院领导盖章：年；月知曰河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了义屮特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章*^(y《年？月弘曰目录中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………4英文缩写…………………………………………………………………8研究论文HER2蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及曲妥珠

3、单抗对卵巢癌SKOV3细胞的影响前言………………………………………………………………9材料与方法………………………………………………………9结果………………………………………………………………17附图………………………………………………………………20附表………………………………………………………………25讨论………………………………………………………………29结论……………………………………………………………32参考文献…………………………………………………………33综述HER2在上皮性卵巢癌中的研究进展…………………………37致谢………………………………………………………………

4、………50个人简历…………………………………………………………………51中文摘要HER2蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及曲妥珠单抗对卵巢癌SKOV3细胞的影响摘要目的：检测HER2蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及基因扩增情况，初步探讨HER2与年龄，病理分期，组织分级，病理类型及淋巴结转移的关系；初步研究新型HER2靶向治疗药物曲妥珠单抗（赫赛汀，Herceptin）对HER2蛋白过表达的卵巢癌SKOV3细胞增殖的作用，对SKOV3细胞凋亡、周期及早期凋亡蛋白caspase-3表达的影响，分析曲妥珠单抗的抗肿瘤机制，进一步探讨HER2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用，为上皮性卵巢癌的

5、靶向治疗提供实验依据。方法：1收集河北医科大学第四医院妇产科2013年2月～2014年2月期间手术切除并经病理证实的上皮性卵巢癌56例（其中浆液性乳状头囊腺癌40例，黏液性乳头状囊腺癌16例），术前均未接受过激素治疗或放化疗，患者的年龄为35～75岁，平均58.2岁。选取上皮性卵巢良性肿瘤20例（浆液性乳头状囊腺瘤13例，黏液性乳头状囊腺瘤7例），正常卵巢组织15例。根据FIGO标准，在56例上皮性卵巢癌中，I～II期21例，III～IV期35例。高分化（G1）13例，中分化（G2）21例，低分化（G3）22例。淋巴转移阳性者40例，淋巴转移阴性者16例。采用免疫组化（IHC）SP

6、方法检测HER2蛋白在上皮性卵巢癌、上皮性卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达情况。采用qRT-PCR法检测HER2基因在上皮性卵巢癌及正常卵巢组织中的相对扩增情况。实验所得数据应用统计软件SPSS13.0处理，以P<0.05为差异具有显著统计学意义。2体外培养人上皮性卵巢癌SKOV3细胞，37℃，5%CO2的恒温培养箱中传代培养并冻存。3本实验分为对照组（药物浓度为0μg/l）及不同浓度曲妥珠单抗（赫赛汀，Herceptin）药物组，采用MTS方法检测SKOV3细胞加不同浓度赫赛汀（5、10、20、40和80μg/l）继续培养48h后，药物对细胞增殖活力的影响，计算相应浓度抑制率及

7、IC50。1中文摘要4本实验分为对照组（药物浓度为0μg/l）及不同浓度曲妥珠单抗（赫赛汀，Herceptin）药物组。SKOV3细胞加不同浓度的赫赛汀（0、10、20、40μg/l）继续培养48h后，采用PI染色法利用流式细胞仪对其进行细胞周期的分析；采用AnnexinV/PI染色法利用流式细胞仪对其进行细胞凋亡分析；采用Westernblot法检测细胞内早期凋亡蛋白caspase-3的相对表达情况。实验所得数据应用统计软件SPSS13.0处理，以P<0.05为差异