大豆疫霉gpcr-pipk基因及psimpa和psbtsl的功能研究

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1、分类号S鲍212学号2壁!壁2垒2壁12南京盛黄戈萼博士学位论文大豆疫霉GPCR—PIPK基因及PsIMPA和PsBTSl的功能研究杨新宇指导教师垂蘧趣夔攮专业名称植堑痘堡堂研究方向墓董遗伎皇筮王生物堂答辩日期三Q二三生盔且FUNCTIoNALANALYSIS0FGPCR．PIPKGENEANDPSIMPAANDPSBTSlINByYANGXINYUSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequireme

2、ntsFortheDoctoralDegreeofPhilosophySupervisedbyProfessorWANGYUANCHAoCollegeofPlantProtection，NanjingAgriculturalUniversityNanjing210095，P．R．ChinaJune2013原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做

3、出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：利切彳叮多少哆年‘月台Et学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密由／(请

4、在以上方框内打“4")学位论文作者(需亲笔)签名：手!汐磊竹雪№f≥年占月6Et导师(需亲笔)签名：妨招嘭，pJ≥年岛月6日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．I引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～V．丁li⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．上篇文献综述第一章亲核蛋白的研究进展⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12亲核蛋白的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l3大分子蛋白质进入细胞核的过程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33．1入核蛋白．importina／importinB三聚体的形成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43．2入核蛋白三聚体通过核孔复合体进入细胞核⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53．3入核蛋白、lmportina／import

6、in13三聚体的解离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯63．4Importinot．CAS．RanGTP转运出细胞核⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯84亲核蛋白基因家族的起源和进化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯85亲核蛋白在动物中的研究概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一96亲核蛋白在植物中的研究概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．117亲核蛋白在酵母中的研究概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．128亲核蛋白在真菌和卵菌中的研究概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．13参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14下篇研究内容第一章新型GPCR．PIPK基因PsGK4和PsGK5的功能分析和定位研究⋯⋯．251材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．281．1供试菌株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯281．2转化载体的构建和沉默转化子的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯281．3PsGK4和风GK5沉默转化子的表型分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯．281．4PsGK4和PsGK5沉默转化子的致病能力测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．281．5沉默转化子RNA的提取和实时定量PCR⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．281．6异黄酮的趋化性和外源添加性激素实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯291．7红色荧光定位载体的构建和稳定转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯291．8共聚焦显微镜观察红色荧光的定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一302．1PsGK4和AGJ融的生活史