p53亚细胞定位变化对pold1基因启动子活性的影响.pdf

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1、!第!"卷!第&期!$%%"年&月’’’*’#亚细胞定位变化对89":;基因启动子活性的影响"朱晓宇!"""李!莉!!!!!!!"""!徐!恒!张海江!宋楠萌!孙建华!石!磊!桑建利!#北京师范大学教育部细胞增殖与调控重点实验室#北京!$$%)’!"#N5HBB0BDU81/5/48#,-BFR]4/Z8FE/@R#ML&$&&"#]NL摘要!!KX3UY基因编码

2、,M?K(C’&重组质粒的人乳腺癌UA?)细胞中!C’&表达增强#SQ(KAS结果显示KX3UY基因-SJL表达受到抑制#染色体免疫共沉淀和荧光素酶报告基因实验证明C’&在细胞内与KX3UY启动子直接结合抑制其启动子活性#荧光显微镜观察发现,M?K(C’&在M!期进入细胞核而在N期和M"期则被转运至细胞质#在稳定表达的C,M?K(C’&细胞系中!细胞周期同步化后KX3UY启动子活性在细胞周期各时相均处于较低水平#证明了细胞内C’&高表达后通过直接与KX3UY启动子结合而抑制KX3UY基因表达!且这种抑制作用不受细胞周期进程的影响#关键词!

3、!)@7/!*2+

4、!的结合位点#且复制过程中#CB0_与细胞增殖核抗原$KAJL&及复C’&可以通过与NC!竞争结合该区域而抑制KX3UY)!!*制因子A$S?A&构成的CB0_全酶在SJL引物形成启动子活性#但是#目前尚没有证据证明C’&可后结合复制叉#替换CB0‘#并以其持续合成能力最以在细胞内与KX3UY启动子直接结合#)&+’*终完成了前导链和后滞链的延伸#肿瘤抑制因子C’&能够参与细胞周期调控"人类细胞中#编码C!"’亚基的KX3UY基因定

5、*程#C’&基因的突变有可能直接导致细胞恶性转)*+%*)!&*个内含子#其主要转录起始位点位于翻译起始化#做为转录因子#C’&能够通过结合保守序列)T*)!+*位点LQM上游第’&个核苷酸处#与许多

6、科学基金资助项目$批准号%&$")$**&&!""共同第一作者及共同通讯作者#,(-./0%H846*%%%!R.HBB#5B-"""通讯作者#,(-./0%E.462/.40/!"*0@!第!"卷!第&期!$%%"年&月’’*中间由变异较小的$+!&7C核苷酸隔开#在受C’&530@3F85B0085@/B4&提供的方法#人乳腺癌细胞系调控的众多基因中#+ZY/[5NY/M/+Y基因是较多UA?)用SKUY!*+$$^R50B48&培养基添加!$O胎)!’*被人关心的一个#+ZY/[5NY/M/+Y编码的A<牛血清培养于&)aA

7、含’OAW"的温箱中#该细胞)""*抑制因子C"!能够结合多种AR50/4及A<而引起系表达野生型C’&#)!**细胞周期阻滞#也能与CB0_竞争KAJL上的结能够稳定表达,M?K(C’&融合蛋白的UA?)()!)*合位点#进而影响

8、组稳定的重要调控蛋白#行#转染+%H后#在培养基中加入终浓度为C’&还具有&l+’l核酸外切酶活性#体外