ebv编码的barf1基因通过pi3kakt、mapkerk12和ikknf-κb信号通路调节鼻咽癌细胞的凋亡

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1、分类号B兰2曼UDC52墨密级公珏编号!Q2窆墼!Q!箜3QEBV编码的戤胛1基因通过P13K／AKT、MAP刚ERKl／2和Il叫NF．KB信号通路调节鼻咽癌细胞的凋亡EPSTEIN．BARRVIRUS．ENCoDEDBARFlGENEREGULATESTHEAPOPTOSISTHROUGHP13K／AKT,MAPK／ERKl／2ANDIKK／NF．KBSIGNALINGI哈THⅥ後YINNASOPHARYNGEALCARCINoMACELLS指导教师：作者姓名：申请学位：学科专业：论文提交日期：论文答辩日期：学位授予单位：学位授予日期：答辩委员会主席：评阅人

2、：周天戟教授徐美琴医学硕士学位临床检验诊断学2013年6月日2013年6月6日江苏大学2013年6月日黄新祥教授独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：徐是琴1。I；年口‘月，‘日学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家

3、图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生处办理。本学位论文属于不保密团。学位论文作者签名：徐乏琴2．oI；年·5月I1日指导教师签名：户《h矽<7卵’年‘月‘占同江苏人学硕士学位论文摘要目

4、的：研究P13K／AKT、MAPK／ERKl／2和IKK／NF．r．B信号通路以及bcl．2、bcl-xL和bax基因在介导EBV编码的BARFl基因调控鼻咽癌细胞凋亡中的作用。方法：以pSG5载体稳定转染的鼻咽癌细胞系CNEl(CNE．pSG5)为对照，采用Hoechst33342染色法和活细胞计数法分析BARFl稳定表达的CNEl细胞(CNE-BARFl)在抗肿瘤药顺铂存在下细胞凋亡的状况，荧光抗体染色法分析NF．rd3p65蛋白的核转位，免疫印迹法分析IKK、IKB、AKT和ERKl／2的磷酸化，以及Bcl．2、Bcl．xL和Bax蛋白的表达水平。进而分别

5、采用I酬F．KB、P13K／AKT和MAP肌RKl／2的特异性抑制剂Bayll．7082、LY294002和U0126处理CNE-BARFl细胞后重新分析以上指标的变化。结果：与CNE．pSG5对照细胞相比，CNE-BARFl细胞中顺铂诱导的细胞凋亡率显著降低(P0．05)。采用Bayll．7082

6、处理后，CNE．BARFl细胞中NF．r,Bp65蛋白的核转位明显减少，Bcl．2和Bcl．xL蛋白的表达量显著下降(P<0．05)，而Bax升高，但无统计学意义(伶O．05)。分别采用LY294002和U0126处理后，CNE．BARFl细胞中NF．KBp65蛋白的核转位均明显减少，同时IKK和lKB的磷酸化水平、以及Bcl．2和Bcl．xL蛋白的表达量显著下降(氏O．05)。结论：BARFl基因通过P13l<／AKT和MAPK／ERKl／2途径激活了NPC细胞的NF．1cB信号通路，上调了NPC细胞bcl-24r肇7bcl-xL基因的表达，进而增强了其抗凋亡

7、活性。关键词：EB病毒；BARFl；鼻咽癌：NF．rB；P13K／AKT；MAPK／ERKl／2：bcl．2；bcl饯己：baxEBV编码的BARFI皋闪通过P13K／AKT、MAPK／ERKl／2和IKK／NF．KB信吁通路调节鼻咽}帛细胞的凋fABSTRACTObjective：TostudytherolesofP13K／AKT,MAPK／ERKl／2andIKK／NF—KBsignalingpathway,andbcl一2、bcl-xLandbaxgeneexpressioninmediatingtheapoptosisregulatedbyEpstein

8、-Barrvirus-e