黄秋葵花多糖分离纯化、初步表征及生物活性研究

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1、UDC鱼!墨：!密级公珏宝扁号!Q2窆窆墨!!15Q2鱼@江艨大擎硕士学位论文黄秋葵花多糖分离纯化、初步表征及生物活性研究1h‘一-●l··’●』●1ruriIlcation，DreltmlnaIVCIIaraCtenZatlonandbiologicalactivityofpolysaccharidefromflowersofAbelmoschusesculentus指导教师鲤担壹塾拯作者姓名郑焦申请学位级别亟±学科(专业)生荭堂论文提交日期至Q里垒生量旦论文答辩日期2Q呈垒生鱼且学位授予单位和日期迤菱太堂答辩委员f嘲聊学位

2、论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权江苏大学可以将本学位论文的全部内容或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密i。位论文作者签名：留以节指导教师签名：P仰撇知，F年钥厂日矽，声年∥月尸日独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己注明引用的内容

3、以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：象p辛日期：扣，贮年‘月夕日江苏大学硕士学位论文摘要黄秋葵(AbelmoschusesculentusL)，又称秋葵、女人指、羊角豆等，为锦葵科秋葵属一年草本植物。黄秋葵的果、花、叶、根等都可食用，集丰富的营养物质与药用保健功效于一身。目前国内外对于黄秋葵植物的开发利用多集中于嫩荚和种子，黄秋葵花常被当做废弃物丢弃，导致资源的浪费。因此，本文

4、系统分析黄秋葵花的组成及营养成分，对其中的多糖组分进行分离纯化，初步表征和生物活性研究，为黄秋葵花多糖的研究开发提供依据，为黄秋葵资源的综合利用提供新途径，该研究对人类健康和社会经济发展具有重要意义。主要研究内容如下：1．黄秋葵花的成分分析和体外抗氧化活性研究。系统分析了黄秋葵花的组成成分和营养成分，结果表明，黄秋葵花干粉中水分含量为11．354-O．10％，灰分含量为5．62士0．81％，粗脂肪含量为1．274-0．02％，粗蛋白含量为15．844-0．85％，总糖含量为22．264-0．25％，总黄酮含量为4．714-0．

5、34％。黄秋葵花中含有11种脂肪酸，其中不饱和脂肪酸所占比例为52％；含有16种氨基酸，其中谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸和络氨酸含量较高，依次为9．40、1．97、1．43和1．38me,／1009黄秋葵花干粉；黄秋葵花中含有Na、K、Ca、Mg、Zn、Fe、Mn等丰富的微量及常量元素，以K元素含量最高，为114．224-7．69mg／1009黄秋葵花干粉。体外抗氧化活性结果表明，黄秋葵花的水提取物和甲醇提取物均有较好地清除DPPH自由基和ABTS自由基活性。由此可知，黄秋葵花具有丰富的营养物质，值得深入研究和利用。2．．黄秋葵花

6、多糖的提取和纯化。水提醇沉所得的黄秋葵花多糖经三氯乙酸法脱蛋白后，采用DEAE．52纤维素和SephacrylⅢS-500丙烯葡聚糖凝胶柱分离，得到黄秋葵花多糖组分OFPS11。高效凝胶渗透色谱分析表明，OFPSl1是单一峰，且峰形对称，说明纯化效果较好。HPLC法测定其分子量为1．7×106Da。3．黄秋葵花多糖组分OFPSll初步表征。气相色谱分析结果说明OFPSll主要由半乳糖和鼠李糖组成，其摩尔比为2．23：1。刚果红实验结果表明，．OFPSll中具有三螺旋结构；通过改变OFPSl1溶液的处理温度、pH值、加入刚果红等

7、发现，其相应的圆二色谱图均发生显著变化，表明外界条件的变化会影响OFPSl1黄秋葵花多糖分离纯化、初步表征及生物活性研究的立体构象和非对称性；AFM结果表明OFPSll在溶液中主要以聚集体形式存在，高度在1nm～20nm不等；SEM实验发现，OFPSll为粗糙的小片状组成的聚集体，但聚集体的规整性不强，为无定型结构。4．黄秋葵花多糖组分OFPSll免疫调节机制的初步研究。选用腹腔巨噬细胞RAW264．7，通过间接M1vr实验发现，经OFPSIl刺激的RAW264．7细胞本身以及细胞培养液均能有效抑制人肝癌细胞HepG．2的增殖

8、。中性红吞噬实验结果表明：与空白对照相比，OFPSll能显著提高RAW264．7细胞的吞噬活性；OFPSll在0～1000gg／mL浓度范围内，能剂量依赖地提高RAW264．7细胞中NO，TNF．0【和IL．1B的分泌量。Westernblot和RT-PCR实验发现：OFPS