大豆疫霉营养生理及慢性生长菌株生物学特性研究

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1、安徽农业大学硕士学位论文大豆疫霉营养生理及慢性生长菌株生物学特性研究姓名：江涛申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：高智谋201206摘要大豆疫霉(翩吵印^历D阳sQ，口PKau缸锄etGerdem锄)是寄生性很强、具有重大经济危害性的病原卵菌之一。本学位论文对大豆疫霉在不同营养条件下对其营养生长和有性生殖生长情况进行了系统研究，讨论了不同培养基，不同碳氮源，不同微量元素及动物激素黄体酮对对菌丝生长速率及卵孢子产生量等性状的影响，同时，对研究中发现的一株慢生长菌株HN．1的培养性状、致病力及传染规律等生物学特性进行了研究，主要研究结果如下：1不同培养基对大豆疫

2、霉菌丝生长及卵孢子产生量的影响本研究探讨了不同培养基对大豆疫霉(用吵印^砌D阳s咖e)菌丝生长速率及卵孢子产生量的影响。结果表明，菌株AH在各培养基上的生长速率大小顺序依次为：OMLA、MA>LBA>10％V8>CA>TA>SBA>PDA，菌株SD依次为：oN【A、Ⅳ【A>TA>LBA-CA>10％V8>SBA>PDA；菌株HN．1分另0为：OMA>MA>10％V8>LBA>TA>CA>SBA>PDA；菌株HN．2为OMA、MA>TA>LBA>10％V8>CA>SBA>PDA；菌株AH在各培养基上的卵孢子产生量大小顺序依次为：lO％V8>LBA>OMA>MA>SBA

3、>TA>CA>PDA，菌株SD依次为：10％V8>LBA>OMA>TA>SBA=MA>CA>PDA；菌株HN．1分别为：10％V8>LBA>CA>SBA>TA>OMA>MA>PDA；菌株HN．2为10％V8>CA>SBA>LBA>OMA>TA>凇>PDA；二者规律不一致，相关性分析进一步说明大豆疫霉对营养生长的营养需求与有性生殖营养需求有所不同，且不同来源菌株表现不一。供试菌株在10％V8、LBA上营养生长与生殖生长较好，PDA不适合其生长。2不同碳、氮源对大豆疫霉菌丝生长的影响本研究讨论了大豆疫霉菌株HN一2在含有不同碳氮源人工合成的培养基上菌丝的生长情况。结果表

4、明，麦芽糖培养基上菌落直径最大，达到90mm，其次是蔗糖、葡萄糖、果糖，菌落直径分别是73．67mm、68．67mm、56．83mm；利用最差的是淀粉，菌落直径为41mm；缺碳对照的培养基上菌落直径最小，仅为20．33mm；门冬酰胺为氮源的培养基上菌落直径最大，达到68．671111n，其次为脲，NaN03、(NH4)2S04、NH4C1分别为26．5mm、17．5舢、16．17mm，无氮对照菌落直径为42mm。病原茵对单糖、多糖都能吸收利用，对有机氮源都能较好的吸收利用，对无机氮源不能较好的利用，说明该菌对碳源的要求较严格，对氮源的要求不是很严格。3微量元素对大豆

5、疫霉菌丝生长的影响本研究探讨了培养基营养中加入浓度为50“g／L的不同微量元素对大豆疫霉(鳓y却Iil砌D朋sD胁e)菌株HN一2菌丝生长的影响。结果表明，供试菌株HN．2在含有50pg／LB”的培养基上菌株HN．2的菌落直径最大，达到56．50mm，其次为加入M06+、MIl2+、Zn2+的培养基，菌落直径分别为56．oomm、54．50IIlm和53．oomm，加入复合微量元素的培养基上菌落直径为51．50mm，不加入微量元素的对照培养基上茵落直径为48．33mm，加入50“∥LC02+、Cu2+、Fe2+的培养基上菌落直径分别为39．17mm、35．oolIl

6、In以及26．17mm。从菌落形态看，加入50¨∥LB”的培养基上菌株长势最好，加入M06+、Mn2+、Zn2+的培养基上菌丝生长较好，说明加入以上微量元素一定程度上促进了菌株HN．2的营养生长，加入50p∥LC02+、Cu2+、Fe2+的培养基上菌丝生长较差，说明上述微量元素对病原菌的营养生长有抑制作用，是否为浓度过高引起的金属毒害有待进一步研究。4动物激素对大豆疫霉菌丝生长及卵孢子产生量的影晌本研究探讨了不同浓度的动物激素黄体酮对大豆疫霉(聊鲫，^搋。旭sQ肛e)菌丝生长及卵孢子产生量的影响。结果表明，不同处理对大豆疫霉菌株HN．2的营养生长和生殖生长都有显著影

7、响，在不加黄体酮的培养基上菌落直径仅为23．25mm，且菌丝稀疏，菌落边缘不规则，而加入20、40、60、80ppm黄体酮的培养基上菌落直径分别增加至34．5、33．5、32．5、30．5mm，且菌落厚度增加，菌丝致密。卵孢子产生量的测定结果表明，加入动物激素黄体酮后菌株的卵孢子产生量有了一定程度的提高，随着黄体酮浓度由20ppm增加至80ppm，大豆疫霉的菌株的卵孢子产生量先提高后抑制，每mL卵孢子悬浮液中卵孢子数量分别为140、220、140、60。上述结果表明，在培养基中加入较低含量的动物激素黄体酮可以一定程度促进该菌株的营养生长且能提高其有性生殖卵孢子的