甲状腺乳头状癌组织中smad4基因表达及其启动子甲基化相关性研究

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文论文题目：里达避塾达趑疸组织主§堕鱼垒基固麦鲨拯墓启动王里基化担差丝班究答辩委员会主席：塍理鲎教援答辩委员会成员：虞益拦教授鄞贵蕉教援萱玉麟麴援日U，I蔓至多丛]昱陵褪贤教援论文答辩日期：2Q!垒1512垒万方数据温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3Abstract⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯。．⋯⋯．⋯．．．⋯⋯⋯．．．⋯!；jj}I言．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．9材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25d、结⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯。28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。29附勇匙⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33参考文献

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41万方数据温州医科大学硕士学位论文甲状腺乳头状癌组织中Smad4基因表达及其启动子甲基化相关性研究中文摘要目的：探查Smad4基因在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其启动子甲基化情况，探讨Smad4基因表达异常与甲状腺乳头状癌发生发展的关系及其生物学意义。材料与方法：l、材料：选自台州学院附属台州市立医院肿瘤外科2013年1月至2013年8月期间收治甲状腺乳头状癌手术病例标本共40例，分为卖验组和对照组。其中实验组甲状腺乳头状癌20例，男性3例，女性17例，年龄

4、21-59岁，平均44．6岁，根据患者性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移情况、临床分期等因素分为亚组。实验组20例病例中，其中年龄≥45岁14例，<45岁6例；肿瘤直径>lcm的17例，肿瘤直径≤lcm的3例；伴淋巴结转移6例，无淋巴结转移14例。对照组为结节性甲状腺肿手术中腺肿周围大体观相对正常组织标本，其中男性5例，女性15例，年龄23-65岁，平均42．3岁。所取40例标本组织体积约6X6mm大小，其中1／2置于4％福尔马林溶液中固定，用于免疫组织化学检测；另1／2置一80。C低温冰箱中保存，用于Real—timePCR、蛋白质印迹及甲基化特异性PCR检测Smad4基因的表达。所有标本组

5、织选取均经患者同意，术前未行放疗或化疗治疗，术后病理证实。2、方法2．1Immunohistochemistry(免疫组织化学，IHC)：检测Smad4蛋白在甲状腺乳头状癌组织及正常甲状腺组织中的表达；检测TGF-131蛋白在甲状腺乳头状癌组织及正常甲状腺组织中的表达；数据统计用卡方检验比较组间计数资料，P<0．05时认为差异有统计学意义。2．2Real—timePCR(实时定量PCR)：检测Smad4基因mRNA在甲状腺乳头状癌及对照组组中的表达情况并进行对比分析，组间计数资料比较使用卡方检验，P<0．05认为差异有统计学意义。2．3Western—blot(蛋白质印迹法)：检测Smad4

6、蛋白在甲状腺乳头状癌和正常甲状腺组织中的表达情况，组间采用t检验，P<0．05认为差异有统计学意义。2．4MSP(甲基化特异性PCR)：检测甲状腺乳头状癌和对照组组织中Smad4基因的启动子甲基化情况并进行对比分析，组间计数资料比较采用卡方检验，P<0．05认为差异有统计学意义。结果：1、Immunohistochemistry(IHC)：20例甲状腺乳头状癌组织中有7例Smad4万方数据温州医科大学硕士学位论文蛋白表达呈阳性，对照组20例标本中其中18例Smad4蛋白表达呈阳性，卡方检验比划两组数据，P=O．0010，差异具统计学意义(P

7、阳性表达率为85．096(17／20)，而在对照组中的阳性表达率为50．0％(10／20)，组间计数使用卡方检验，P=O．0428，差异具统计学意义(P<0．05)。比较肿瘤组中Smad4蛋白在年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移等亚组间的表达，用Fisher’SExact方法检验，P>O．05，无统计学意义。j2、Real—timePCR：采用相对定量2‘△出‘方法处理Smad4基因mRNA在甲状腺乳头状癌组织