斑马鱼p26s-8基因克隆及功能研究

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1、大连海事大学硕士学位论文斑马鱼p26s--8基因克隆及功能研究姓名：陈晓宁申请学位级别：硕士专业：生物物理学指导教师：杭晓明20120626中文摘要摘要太空环境中微重力条件会导致基因和蛋白表达谱发生变化。前期蛋白双向电泳结果初步表明，模拟微重力处理会引起斑马鱼P26S一8蛋白表达发生显著变化，Q—PCR结果表明肌s昭基因表达发生显著下调。因此，推测该基因是微重力感受基因。目前，关于肋奢书基因的功能研究较少，在斑马鱼中该基因尚未被克隆及研究。本文以斑马鱼(Daniorerio)为模式生物，利用NASA研制的微重力

2、模拟系统RCCS(RotaryCellCultureSystem，RCCS)进行地面模拟。从肋j昭基因全序列的克隆、对应蛋白在微重力条件下表达变化的定量分析及其在细胞周期调控中的作用三方面，对微重力感受基因朋饴昭进行了深入的研究。本论文首次克隆获得了斑马鱼脚奢稻基因的全序列，并对序列进行了初步分析及构建了进化树。对P26S一8蛋白在模拟微重力处理前后表达水平的定量分析表明：模拟微重力处理24hpf一48hpf和24hpf一72hpf的斑马鱼胚胎P26S一8蛋白水平发生显著上调，分别为处理组的1．18和1．22倍

3、。同时发现，模拟微重力处理会导致斑马鱼胚胎的孵化产生延迟。利用斑马鱼胚胎成纤维细胞系ZF4进行细胞周期检测的结果表明：模拟微重力处理会使zF4细胞的细胞周期阻断在Gl期，抑制P26S一8蛋白也会导致细胞周期阻滞在G1。模拟微重力处理是否通过影响彬奎昭对斑马鱼细胞G卜S期的调控，进而导致胚胎发育的延迟，尚待进一步验证。本课题获得的研究结果，为进一步揭示微重力产生的生物学效应机制提供了数据。关键词：聊s币基因；模拟微重力；克隆；ZF4细胞系ABSTRACTM1crograVltyenVlromnent0fSpace

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