c18-鞘糖脂在脑胶质瘤中的表达及其在耐药中的功能研究

《c18-鞘糖脂在脑胶质瘤中的表达及其在耐药中的功能研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：扯日期：边斗苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相

2、一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属弯——年一月解密后适用本规定。非涉密论文日论文作者签名：导师签名：企奎金日名踟期：2D，)．亏．I华期：Z丝：堑!fC18鞘糖脂在脑胶质瘤中的表达及其在耐药中的功能研究中文摘要第一章C18-鞘糖脂在

3、胶质瘤组织中表达研究。目的：寻找在胶质瘤组织样本中的异常表达的鞘糖脂并鉴定其具体结构。方法：(1)采用线性离子阱质谱获得胶质瘤组织样本中中性鞘糖脂的表达谱，寻找胶质瘤特异性差异表达的中性鞘糖脂；(2)采用多级质谱技术分析鉴定胶质瘤特异性差异表达的中性鞘糖脂的具体结构。结果：(1)质谱初步表征结果显示C18峭糖脂在胶质瘤组织样本中显著高表达；(2)多级质谱分析结果显示具有差异表达的中性鞘糖脂主要是以C18-GlcCer、C18-LacCer、C18-Gb3、C18-Gb4等一系列含有C184申经酰胺(d18：1／18：

4、0)的鞘糖脂为主。结论：C18-男旨肪酸链的鞘糖脂在胶质瘤组织样本中高表达关键词：质谱；鞘糖脂；C18--,-鞘糖脂；胶质瘤第二章胶质瘤组织中高表达C18-鞘糖脂与胶质瘤的肿瘤耐药相关目的：研究胶质瘤组织中高表达C18鞘糖脂与胶质瘤肿瘤耐药的相关性，从细胞、鞘糖脂、基因等水平探讨胶质瘤细胞系中异常高表达c18捎糖脂与胶质瘤的肿瘤耐药的关系，从而探讨C18捎糖脂与胶质瘤肿瘤耐药的相关性。方法：(1)筛选胶质瘤细胞系，寻找具有差异表达C18峭糖脂的胶质瘤细胞系来研究C18尊j糖脂的功能，并用MTT方法检测替尼泊苷对不同c

5、18-鞘糖脂表达水平的胶质瘤细胞系杀伤作用；(2)采用药物梯度培养的方法，体外建立胶质瘤耐药细胞系，研究其C18峭糖脂在胶质瘤细胞耐药前后表达变化及相关耐药基因MDRl及MRPl的变化；(3)采用siRNA的方法，沉默C184申经酰胺合成酶LASSl(CerSl)，检测基因沉默前后耐药情况和C18前j糖脂表达情况的变化；(4)采用real-timePCR和免疫组化方法检测耐药胶质瘤组织及细胞系中的LASSl(CerSl)的表达水平。结果：(1)MTT结果显示，替尼泊苷对表达不同C18峭糖脂水平的胶质瘤细胞系杀伤水平不

6、同：C18稍糖脂表达高的A172细胞系对替尼泊苷不敏感(IC50约中文摘要C18鞘糖脂在脑胶质瘤中的表达及其在耐药中的功能研究在10I-tmol／L)，而对C18-鞘糖脂表达量低的U251细胞系对替尼泊苷较敏感(ic50约在O．4I-tmol／L)；(2)U251细胞系经体外梯度培养替尼泊苷后，其ICso从O．4lxmol／L上升到25}tmol／L，其耐药相关基因MDRl、MRPl基因的表达水平均上升；同时质谱结果显示：耐药后的胶质瘤细胞系较耐药前C18-鞘糖脂的表达量上升，特别是C18-Gb4显著性上升；(3)基

7、因沉默LASSl(CerSl)后，其IC50没有发生显著差异，其C18游离神经酰胺及C18-鞘糖脂表达水平也没有发生显著改变；(4)real-timePCR及免疫组化结果均显示诱导耐药的细胞系及胶质瘤组织样本中LASSl(CerSl)的高表达，但其下游的C18游离神经酰胺却无显著变化。结论：c18硝糖脂的高表达与胶质瘤的药物耐药正相关，C18硝糖脂可能参与抑制机体胶质瘤的多药耐药反应，进一步证实了鞘糖脂与肿瘤的多药耐药的关系。关键词：C18-鞘糖脂；胶质瘤耐药；MDRl；MRPlⅡ作者：俞云会指导老师：李云森High

8、expressionofdrug-resistance-associatedC18-gIycospnlngonplnsinglioma■●l●●1●一‘AbstractPartIExpressionoftheC18-GSLsinglioma．objective：TostudywhichGSLsareassociatedtogliomaaswel