安定法医毒物动力学研究（一）安定在急性染毒大鼠体内的分布与死后再分布研究

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1、山西医科大学硕士学位论文表l灌注安定大鼠实验设计表1．2．2样品的处理lml血液中加入内标烯丙异丙巴比妥109tg，调节pH=10，乙醚5mL振荡，3000r‘min-1离心，提取2次，合并有机相，40"C水浴挥干，201xL乙醇定容，气相色谱／质谱法定性、气相色谱法定量分析。lg组织匀浆后加入内标烯丙异丙巴比妥10lag，调节pH=10，乙醚5mL振荡，3000r-rnin-1离心，提取2次，合并有机相，40℃水浴挥干，20I，tL乙醇定容，气相色谱／质谱法定性、气相色谱法定量分析。1．2．3气相色谱仪气相色谱条件：NPD检测器；

2、色谱柱为DB．5MS(30rex0．25mmx0．25I_tm)毛细管柱；柱温：起始温度200"C(1min)一10"C·min．1--+280"C(4min)；进样口温度250；载气为高纯氦气，流速1．01．tg·IIl】【_1；分流方式进样，分流比1：50。NPD检测器，温度300"C；空气60kp：氢气40kp。1．2．4气相色谱．质谱联用仪(Finnigan)色谱条件：DB．5毛细管柱(30mx0．25mmx0．25肛m)，EI源70ev，质量范围：50--650，柱温：150℃，lmin_lO℃／rain--*280℃，2

3、rain：离子源温度：200℃，传输线温：250℃，载气：He1．5rnl／rnin。4山西医科大学硕士学位论文1．3统计方法实验所得数据用均数±标准差(x±s)表示，各组数据用SPSS11．5软件对组织与血液中安定的含量进行。2结果2．1安定急性中毒表现空白组大鼠在灌胃后，至2h处死时，活动正常。实验组大鼠在灌胃后20min左右开始出现昏醒，呼吸变浅变慢，心跳缓慢，脉搏细弱，甚至出现深昏迷和反射消失。有部分大鼠出现昏迷直至到处死时。2．2安定气相色谱图空白血、标准添加血和染毒大鼠血的气相色谱图见图1-4。安定的tr为9．75min

4、，内标物烯丙异丙巴比妥的仃为3．25min，分离效果好，色谱图分别见图1-4。图1．空白血提取物气相色谱图Fi91．GC-NPDchromatogramofblankblood图2．标准品安定及内标烯丙异丙巴比妥气相色谱图Fi92．GC-NPDchromatogramofstandarddiazepamandaprobarbital内标物Internalstandardallylbarbitonetr=-3．25min安定diazepamtr==9．75min5山西医科大学硕士学位论文图3．血中添加安定气相色谱图Fi驴．GC-NPD

5、chromatogramofdiazepaminblankblood内标物Internalstandardallylbarbitonetr=3．25min安定diazepamtr=9．75min图4．染毒大鼠血中安定气相色谱图Fi94．GC-NPDchromatogramofdiazepaminpoisoningblood内标物Internalstandardallylbarbitonetr=3．25min安定diazepamtr=9．75min2_3回收率及精密度试验精密吸取15份空白全血lmL，分为3组，分别加水lmL，混匀。每

6、组分别加入安定O．5、1．0、4．01．tg，按1．2．2全血样品处理项方法处理测定。同时取ld内5次测定结果计算日内相对标准差，以3d内5次测定结果计算日间相对标准差。见表2。6山西医科大学硕士学位论文8．0表2．安定回收率及精密度(n---5)全血0．50．49士O．02598．05士-4．55．351．00．97士O．04597．05tL4．55．357．2343．82士0．2l95．43士5．253．624．46样品线性方程线性范围相关系数最低检出限X为安定和内标物峰面积比值；Y为安定含量(1ag-mL"1或嵋虿1)2．5安

7、定在急性染毒大鼠体内的分布表4．安定在急性染毒大鼠体内的分布(mg-mL-1或mg．g-i)(n啕Table4．Distributionofdiazepaminacutepoisonedrats(rag·mL-1OFmg·g-1)(n啕心血心肝脾肺肾脑肌均数1．232．56·72．79．62．31．93．9标准差0．06O．0810．36O．1471．620．86O．1520．37图5安定急性染毒大鼠体内的分布Fi95．Distributionofdiazepaminacutepoisonedrats7第二部分安定在急性染大鼠体内的

8、死后再分布研究中毒法医学鉴定中常以尸体心血的毒物浓度代表死亡当时的毒物血浓度为法庭提供科学依据。但自上世纪70年代以来，大量实践及研究发现，许多药毒物的浓度在尸体内分布并不稳定，尸检时从心腔内或某一脏器检测出的毒物含量不能真实反映死亡