大型真菌its鉴定及8种野生蕈菌的驯化研究

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1、中图分类号：Q936UDC：579诃业芒解■刚粤(1砷密级：学校代码：硕士学位论文(学历硕士)公开10094大型真菌ITS鉴定及8种野生蕈菌的驯化研究IdentificationofmacrofungibyITStechniqueandstudiesondomesticationof8speciesofwildfungi作者姓名：刘红霞指导教师：王立安教授学科专业名称：生物化学与分子生物学研究方向：大型真菌资源的研究与开发论文开题日期：2012年9月8日二。一四年三月十日h事尢乒Do．-学位论文原创性声明本人所提交的学位论文《大型真菌ITS鉴定及8种野生蕈

2、菌的驯化研究》，是在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的原创性成果。除文中已经注明弓用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中标明。本声明的法律后果由本人承担。论文作者(签名)：力孵卵功日剀红霞学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在——年解密

3、后适用本授权书)论文作者(签名)：≯瓣岁月砷日朝应霞指导教师(签名)为纷年岁月刁日摘要我国野生菌物种资源十分丰富。据不完全统计，我国食用菌(包括药用菌)约2000余种，其中已驯化成功的有50余种，主栽品种20多个，支撑了我国食用菌产业的健康、快速发展。本研究首先采用18SrDNA和28SrDNA基因间隔序列(ITS)鉴定技术，对从河北省野生菌产区采集到的27种野生高等真菌子实体及17种来自子实体的菌丝体(分离菌种)进行了鉴定。随后，对其中8种具有一定食用或药用价值的野生菌种开展了驯化研究，取得的主要结果如下：1．通过ITS分子生物学鉴定，结合形态学特征，确

4、定了27种野生菌的分类地位。2．对17个来自子实体分离菌种的ITS分析结果表明，除1种为污染杂菌外，其余菌种身份均得到确认。3．对8种野生菌的驯化研究结果如下：(1)碳源筛选：最适宜橘黄裸伞和朱红栓菌生长的碳源为蔗糖；最适宜肉色香蘑、水粉杯伞、小白蘑和紫丁香蘑生长的碳源为可溶性淀粉；最适宜树舌灵芝和香杏丽蘑生长的碳源为麦芽糖。(2)氮源筛选：最适宜橘黄裸伞、树舌灵芝、水粉杯伞、小白蘑、紫丁香蘑生长的氮源为酵母粉；最适宜朱红栓菌生长的氮源为牛肉膏和硫酸铵；最适宜肉色香蘑生长的氮源为硫酸铵；最适宜香杏丽蘑生长的氮源为蛋白胨。(3)无机盐筛选：最适宜橘黄裸伞、朱

5、红栓菌生长的无机盐为磷酸二氢钾，其次是硫酸镁；最适宜树舌灵芝生长的无机盐为硫酸镁，其次是磷酸二氢钾。(4)正交实验结果：橘黄裸伞最适宜的营养因子最佳组合配方为：蔗糖25∥L，酵母粉8g／L，磷酸二氢钾4g／L，硫酸镁2g／L；朱红栓菌最佳营养因子组合配方为蔗糖25g／L，牛肉膏5g／L，磷酸二氢钾3g／L，硫酸镁1g／L。(5)pH筛选：最适宜橘黄裸伞和紫丁香蘑生长的pH为5．5；最适宜朱红栓菌、肉色香蘑、树舌灵芝生长的pH为5．0。(6)温度筛选：最适宜橘黄裸伞和朱红栓菌生长的温度均为25℃。(7)光照筛选：橘黄裸伞、朱红栓菌两个菌株生长过程中均不需要光

6、照，过多的光照还可能抑制橘黄裸伞菌丝的生长。Ill(8)母种培养基配方筛选：最适合橘黄裸伞、树舌灵芝、水粉杯伞生长的培养基为玉米粉培养基；最适合朱红栓菌生长的培养基为木屑+麸皮煮汁培养基；最适合肉色香蘑、香杏丽蘑、紫丁香蘑生长的培养基为PDA+牛粪煮汁培养基；最适合小自蘑生长的培养基为PDA+蘑菇煮汁培养基。(9)原种培养基配方筛选：最适合橘黄裸伞生长的原种培养基配方为棉籽壳+麸皮培养基(棉籽壳83％，麸皮15％，葡萄糖1％，石膏1％，含水量65％，pH6"---7)；最适合朱红栓菌、树舌灵芝生长的原种培养基配方为木屑+棉籽壳培养基(木屑40％，棉籽壳43

7、％，麸皮15％，葡萄糖1％，石膏1％，含水量65％，pH6"--'7)；最适合肉色香蘑生长的原种培养基配方为麦粒+牛粪培养基(麦粒78％，干牛粪10％，麸皮10％，葡萄糖1％，石膏1％，含水量65％，pH6"--'7)。(10)出菇试验：成功获得了橘黄裸伞和朱红栓菌的子实体，橘黄裸伞第一潮菇产量为50g，生物学效率为13．3％；朱红栓菌第一潮菇产量为73g，生物学效率为16．2％。IV关键词：野生菌；ITS鉴定；菌丝体；培养特性；驯化栽培ABSTRACTTherearerichresourcesofwildfungiinChina．Accordingtoi

8、ncompletestatistics，China+Sedible