氨海水和5-羟色胺对海湾扇贝(argopecten irradians lamarck)解剖卵的体外促熟研究

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1、中国海洋大学硕士学位论文氨海水和5--羟色胺对海湾扇贝（ArgopectenirradiansLamarck）解剖卵的体外促熟研究姓名：刘晓赫申请学位级别：硕士专业：水产养殖指导教师：王昭萍201206氨海水和5一羟色胺对海湾扇贝∞留opec招，1f刑d砌，1sLamarc；()解剖卵的体外促熟研究摘要本文以海湾扇贝(爿谱o!pec芒舢jm讲a力s￡a凇rc∞为研究对象，使用氨海水和5．羟色胺对其解剖卵进行体外处理，使卵母细胞成熟受精和发育。研究中探索了氨海水与5．羟色胺的最佳促熟条件，对体外促熟的受精卵进行了培育和观察，并通过荧光显微技术观察

2、了受精卵发育的整个过程的，希望可以为贝类的遗传育种，多倍体诱导等研究提供技术支持。以成熟的海湾扇贝解剖卵为原材料，在不同浓度的氨海水和5．羟色胺溶液浸泡情况下，采取二者单独或联合处理扇贝解剖卵不同时间，研究其体外促熟作用。统计了卵母细胞生发泡破裂率及其体外受精率，以获得最优的体外促熟方法。结果表明：O．005％一0．30％的氨海水均能诱导卵母细胞生发泡破裂(85％左右)，经氨海水处理的卵母细胞可以完成受精，但受精率较低，0．005％浓度的氨海水处理45min的受精率最高，仅为(17．28士O．43)％；经5．羟色胺(5．HT)处理的卵母细胞生发

3、泡破裂率相对较低，但受精率得到显著提高，5．HT浓度为8×10jM、处理30—60min时，受精率达到(26．73士0．95)％；联合处理时先用氨海水处理卵母细胞，然后用5．羟色胺处理成熟卵可以获得最佳效果，受精率达(36．47土0．87)％。对促熟卵的细胞学研究表明：体外促熟处理的受精卵受精率(37．3±1．46)％低于自然排放受精卵的受精率(87．2土1．12)％；同时促熟卵受精后的发育速度明显滞后于自然排卵受精的发育速度。对促熟卵的荧光显微镜研究表明：自然排放的卵母细胞和解剖获得卵母细胞处于第一次减数分裂的不同时期，通过促熟，可以促进解剖

4、获得卵母细胞的成熟。，荧光染色观察揭示促熟受精卵的整个发育过程与自然排放受精卵相同，并记录了海湾扇贝促熟卵受精后的整个发育过程，同时证明了这种促熟方式的可行性。关键词：海湾扇贝；氨海水；5．羟色胺；荧光显微镜ImprOVingMaturationofOocyteStrippedfromSaUop，A，可Dpec抛nfr，。口山口脚i上，口m口九★byAmmoniaSeawaterandSerotoninCreatinineSulfateComplex(5一HT)AbstractEfrectsofinductionwerestudiedtoide

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6、dandtreatedby锄moniaseawaterand5一HTinvi仃o，andtllenf．crtilized枷矗cially．Resultsshowedthat锄moniaseawatercaninduceGenninalvesicleBreal【down(GVBD)ofscallopoocytesr锄破ably，butthefenilizingratewaslow．5一HTc锄otinduceGVBDofoocytes，butcaIlinducethematurationoftheoocytesalreadyGVBD．Ooc矿es

7、firstinducedby锄moniaseawatertlleninducedby5一HTshowedthebeste虢cts，andthefenilizingratewaS(36．47士0．87)％．ThercsearchcaIlpr0VidesupportforthegeneticbreedingaIldpolyploidybreedillgofshellfish．CytologicalstudiesontIleinducedeggshowedmatmef．enilizingrateofinducedegg(37．3±1．46)％waSm

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