蓝细菌中rnasee的c端蛋白与其他蛋白互作的研究 毕业论文

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1、蓝细菌中RNaseE的C端蛋白与其他蛋白互作的研究蓝细菌中RNaseE的C端蛋白与其他蛋白互作的研究目录摘要错误！未定义书签。Abstract2缩略语表21．前言错误！未定义书签。1.1蓝细菌21.2鱼腥蓝细菌PCC7120错误！未定义书签。1.3核糖核酸酶11.3.1多聚核苷酸磷酸化酶PNPase21.3.2核酸核糖酶E31.4研究目的与意义42.实验试剂，材料，仪器和软件52.1实验中所用到的主要试剂22.2实验所用到的菌株22.3实验所用到的主要仪器23.实验方法63.1IPTG诱导目标蛋白的表达63.1.1IPTG诱

2、导蛋白质表达的原理73.1.2IPTG诱导蛋白质表达的实验步骤错误！未定义书签。3.2压力破碎法从PCC7120中提取蛋白错误！未定义书签。3.3镍柱亲和层析法分离纯化目标蛋白错误！未定义书签。3.3.1镍柱亲和层析法分离纯化蛋白的原理错误！未定义书签。3.3.2镍柱的处理错误！未定义书签。3.3.3镍柱结合蛋白错误！未定义书签。3.3.4蛋白的洗脱错误！未定义书签。3.4SDS-PAGE检测目标蛋白的纯度和含量错误！未定义书签。3.4.1安装电泳槽错误！未定义书签。3.4.2分离胶和浓缩胶的制备错误！未定义书签。3.4.3

3、蛋白质样品的预处理错误！未定义书签。3.4.4蛋白质样品上样及电泳错误！未定义书签。3.5dot-blot验证蛋白质的相互作用错误！未定义书签。3.5.1dotblot检测蛋白互作的原理错误！未定义书签。3.5.2dotblot检测蛋白互作的实验步骤错误！未定义书签。3.5.3预实验错误！未定义书签。4.结果与分析24.1蛋白质的纯化结果与分析错误！未定义书签。4.1.1蛋白A4396的纯化结果与分析错误！未定义书签。4.1.2蛋白4331C1-H的纯化结果与分析错误！未定义书签。4.1.3蛋白4332C2-H的纯化结果与分

4、析错误！未定义书签。4.2dot-blot验证蛋白质相互作用的结果与分析错误！未定义书签。23蓝细菌中RNaseE的C端蛋白与其他蛋白互作的研究5.讨论错误！未定义书签。参考文献2致谢错误！未定义书签。23蓝细菌中RNaseE的C端蛋白与其他蛋白互作的研究摘要在大肠杆菌中已被证实，mRNA降解体是以RNaseE为组装支架，PNPase(核苷酸磷酸化酶)三聚体、RhlB(RNA酶解螺旋酶B)单体以及enolase(烯醇化酶)二聚体的相互作用结合共同组成的功能复合物，共同协调完成对mRNA等RNA底物的加工剪切及降解过程。降解体

5、复合物其它几种组分PNPase、RhlB和enolase在RNaseE的C端非催化区域结合位点与RNaseE结合。但是在蓝细菌中RNaseE在mRNA降解体中发挥什么作用及其生理特性并未被证实。鱼腥蓝细菌PPC7120研究蓝细菌的模式菌株，我们以PPC7120为研究对象，分别诱导提纯了PPC7120菌株异形胞中的RNaseE的两个蛋白——居于C端的A4331和A4332以及PNPase的A4396蛋白，用dotblot的方法证明A4331是否与A4332、A4396有相互作用，为研究蓝细菌中RNaseE在mRNA降解体中发挥

6、的作用及其生理特性提供基础。关键词：鱼腥蓝细菌RNaseEPNPase蛋白诱导纯化dot-blot23蓝细菌中RNaseE的C端蛋白与其他蛋白互作的研究AbstractIthasbeenformulatedthattheRNAdegradosomeofEscbericbiacoliisamultiproteincomplexinvolvedinthedegradationandprocessingofmostmessengerRNAs.theprincipalcomponentsareRNaseEactingasascaff

7、oldfortheassemblyofamultiproteincomplex,themonosomeofRNAhelicaseB(RhlB),thetripolymerofpolynucleotidephosp-horylase(PNPase)andthedimerofenolase.RNaseEisamultidomainproteinwithanN-terminalcatalyticregionandaC-terminalnoncatalyticregionwhichcontainssitesforbindingRNA

8、andforprotein-proteininteractionswithothercomponentsoftheRNAdegradosome.However,whatroledoesRNaseEplayintheCyanobacteriahasnotbeencertified.Anaba