肺康饮含药血清对人肺癌细胞(nc-h446)细胞增殖凋亡实验的研究

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1、中文摘要肺康饮含药血清对人肺癌(NC．H446)细胞增殖凋亡的实验研究摘要目的：研究肺康饮的药物血清对人肺癌细胞(NC—H446)形态学、增殖与细胞周期和凋亡率，及其相关基因B细胞白血病／淋巴瘤．2基因(bcl．2)和p53蛋白的影响，探讨肺康饮治疗肺癌的作用及机制。方法：研究对象由中国医科大学细胞室提供的人tH,细胞肺癌NC．H446细胞株，我院实验中心细胞室保存。通过给正常大鼠灌胃制备肺康饮的药物血清，设为含药血清组，正常大鼠血清设为空白血清组，研究不同血清对肺癌细胞的影响。(1)制作肺癌细胞的超薄切片，在透射电镜下观察肺癌细胞的形态学改变；(2)采用咪哇

2、比色分析法(MTT)检测不同浓度药物血清对肺癌细胞增殖的影响；(3)采用流式细胞仪检测药物血清对肺癌细胞周期和凋亡率的影响(4)应用免疫组化方法，检测p53、bcl．2蛋白表达情况。所有数据均用SPSS12软件进行统计学处理。结果：l培养NC．H446人肺癌细胞电镜观察，细胞核、核膜清晰可见，胞质内可见Mi、rER、Ri结构，细胞表面Ⅵ。药物血清处理24h，细胞在电镜下可见细胞核染色质浓淡不均，异染色质凝聚在核周边，可见核仁，细胞膜起皱呈出芽状。药物血清处理48h，可见凋亡小体形成，小体内Mi、rER、外膜清晰，形成多个凋亡小体。2与空白血清组比较，肺康饮药物

3、血清作用12h既有凋中文摘要亡峰(7．43％)出现，24h达高峰为26．10％，而对照组仅为6．7l％，药物血清作用后，GO／Gl细胞明显减少，S期细胞增多5％、10％和15％浓度组的含药血清对肺癌细胞的增殖均有明显的抑制作用(PO．05)3与空白血清组比较，含药血清组肺癌细胞周期缩短和凋亡率明显增高，其差异具有极显著性(P

4、组呈强阳性。bcl．2主要表现为胞浆着色呈棕黄色颗粒，中药组反应强度下降。而空白对照组未见阳性表达。5流式细胞仪分析结果：p53、bcl．2在NC．H446人肺癌细胞株中都有不同程度的表达，药物血清作用后，p53表达增强，bcl．2表达降低，随着作用时间延长，表达变化增强。结论：1肺康饮药物血清具有抑制人肺癌(NC．H446)细胞株增殖作用。2肺康饮药物血清对人肺癌细胞(NC．H446)有显著的缩短细胞周期和诱导凋亡的作用，这可能是其治疗肺癌的重要机制之一。3肺康饮药物血清能促使凋亡小体的形成，说明此方药抑制肿瘤的作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。4肺康饮药

5、物血清能使p53表达增强，bcl．2表达降低，随着作用时间延长，表达变化增强，这可能是其发挥诱导肺癌细胞凋亡的分子机制之一。中文摘要关键词：肺康饮；肺癌；血清药理学；细胞凋亡英文摘要StudyontheProliferationandApoptosisofhumanLungCancer(NC-H446)CellsInducedbyFeikangyinContainingSerumABSTRACTobjective：TostudytheinfluenceofFeikangyinContainingSerumonhumanlungcancercells(NC—H4

6、46)morphology，proliferationandcellcycleandapoptosisrate，anditsrelatedgeneB-cellleukemia／lymphoma-2gene(bcl一2)andp53Protein，trytoanalyzetheeffectandmechanismofFeikangyinonhumanlungcancercells．Methods：Humannon-smallcelllungcancercelllineNC—H446wasfromtheChinaMedicalUniversity，andprese

7、rvedintheCenterLaboratoryofHebeiNorthUniversity．ALLratsweredevidedintotwogroups，Feikangyincontainingserumgroup，normalratsgavagedbyFeikangyin，andblankserumgroup，normalrats．(1)productultra—thinslicesoflungcancercells，andobservedmorphologicalchangesinlungcancercellsundertransmissionele

8、ctronmicroscope；(2)