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《rna干扰survivin基因对k562细胞化疗敏感性的影响及机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、RNA干扰survivin基因对K562细胞化疗敏感性的影响及机制1陈琳基金项目：重庆市教委（x3004－020050033）SupportedbytheFundsbyChongqingMunicipalEducationCommittee(x3004－020050033)作者简介：陈琳（1982～），女，四川南充市人，硕士研究生，主要从事儿童血液肿瘤的诊治的研究。电话：13996393226，email：bonnie_474@yahoo.com.cn通讯作者：徐酉华，女，主任医师，教授，博士生导师，电话：（023）63631890，email：xuyouhua54@163.
2、com，1徐酉华，1温贤浩，1杨山，1于洁，1戴碧涛，2李欣(重庆医科大学儿童医院：1血液科，2临床检验中心重庆，400014）摘要：目的 应用小分子干扰RNA（siRNA）技术抑制survivin基因的表达，观察其对K562细胞化疗敏感性的影响，为临床白血病治疗提供理论依据。方法 实验分为RNA干扰组，脂质体对照组，空白对照组。转染48h后用RT-PCR法，免疫组化法分别检测survivin在mRNA及蛋白水平的表达；MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性；流式细胞仪检测细胞内阿霉素的药物浓度；免疫组化法检测K562细胞中三种耐药相关蛋白P-gp，TOPO-2,GST-π的表达。
3、结果（1）RNA干扰组K562细胞的survivin基因表达水平明显下降；(2)RNA干扰组K562细胞对阿霉素敏感性增高；（3）RNA干扰组K562细胞中阿霉素浓度增高；（4）RNA干扰组K562细胞耐药蛋白GST-π表达水平下降,而P-gp,TOPO-2的表达与对照组比较无显著差异。结论特异性siRNA能够有效抑制survivin基因的表达，并可能通过降低耐药蛋白GST-π的表达增加K562细胞对阿霉素的敏感性。关键词：K562细胞；RNA干扰；survivin；阿霉素；耐药蛋白中图分类号:R733文献标识码：AEffectofRNA-silencedsurvivinge
4、neonsensitivityofK562cellstoadriamycinCHENLin1,XUYou-hua1,WENXiao-hao1,YANGShan1,YUJie1,DAIBi-tao1,LIXin2(1DepartmentofHematology,2CenterofClinicalLaboratory,Children’sHospital,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400014,China)Abstract:ObjectiveToexploretheeffectsofsurvivin-targetedsmallinte
5、rferenceRNA(siRNA)onthesensitivityofK562celllinetoadriamycin(ADM).MethodsK562cellsweredividedintothreegroups:RNAinterference(RNAi)group,lipofectaminegroupandcontrolgroup.Celltransfectionwasinducedbylipofectamine2000.TheexpressionsofsurvivininK562cellswereassayed48haftertransfectionbyRT-PCRa
6、ndimmunohistochemicalmethods.TheproteinlevelsofP-glycoprotein(P-gp),TOPO-2,GST-πweredetectedusingimmunohistochemicalmethods.ThesensitivityofK562cellstoADMwasdeterminedbyMTTandflowcytometry.ResultsAftertransfectionwithrecombinantplasmidpshRNA-survivin,themRNAandproteinexpressionsofsurvivinin
7、K562cellsweredecreasedsignificantly(P<0.05).ThesensitivityofK562cellstoADMwasincreasedinRNAigroupascomparedwithlipofectaminegroupandcontrolgroup(P<0.05).TheproteinlevelofGST-πexpressionwassignificantlylowerinRNAigroupthanthoseintheothertwocontrolgroups(P
