纤维素分解菌的筛选与研究论文-副本

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1、丸决呷范学院本科生学业论文纤维素分解菌的筛选与研究院（部）、专业生命科学学院生物技术研究方向微生物学分子生物学学生姓名学号201001122579指导教师姓名徐晶雪I山丽娜指导教师职称助理实验师2012年12月24口目前，全球能源和环境向人类提出挑战之时，开发利用可再生性资源已成为人类发展中的紧迫课题。纤维素是口然界中存在的最廉价、最丰富的天然可再生资源,存在许多高能氢键。对纤维素分解菌的研究无疑是获得能源的另一种途径。木实验通过对土样屮菌株的筛选，分离出具有一定纤维索酶活力的微生物。在此过程中对纤维素分解菌进行研究。通过分子生物

2、学的技术手段提取产纤维素酶的基因进行PCR扩增、DNA转化，把H的基因整合到受体菌株上，从而得到能分解纤维素的重组型菌种。关键词：纤维素分解菌；分离筛选；重组菌株AbstractAtpresent,theglobalenergyandenvironmentalchallengetohuman,thedevelopmentandutilizationofrenewabil让yresourcehasbecometheurgenttaskofhumandevelopment.Celluloseisthemostcheapandabund

3、antnaturalrenewableresourcesinnature•Ithasmanyhighenergyhydrogenbond-Toresearchcellulosedecompositionmicrobesisundoubtedlyanotherwaytogetenergy.Theexperimentbasedonthesoilsampleswereselectedandisolatecertaincelluloseenzymeactivityofmicrobes.Intheprocessofcellulosedeco

4、mpositionmicrobeswerestudied・ThroughthemolecularbiologytechnologyextractionyieldofcelluloseenzymegenePCRamplification,DNAtransformation,Integratingthepurposegeneintothereceptorstrain,whichcangetrestructuringcellulolyticstrains.Keywords：Cellulosedecompositionmicrobes;S

5、eparationscreening;Recombinantstrains-目录摘要IAbstractI目录II引言11材料与实验方法21.1实验材料与器材21.1.1实验样品21.1.2实验试剂21.1.3实验仪器31.2研究方法4121培养基的配制41.2.2样品的采集51.2.3菌株的分离与筛选51.2.4形态学鉴定51.2.5微生物大小的测定61.2.6菌种纯化61.2.7环境因素对微生物的影响71.2.8基因组DNA提取71.2.9琼脂糖凝胶屯泳71.2.10PCR扩增81.2.11从凝胶屮分离回收DNA的方法81.2.

6、12重组子的构建、转化与筛选91.2.13重组型纤维索分解菌株的验证102实验结果104讨论115结论12［参考文献］13引言纤维素是口然界中存在的最廉价、最丰富的天然可再生资源,存在许多高能氢键,因此其水解、利用较困难，利用微生物分解纤维索能够节省资源又减少对环境造成的污染。纤维索是碳源营养物质，已知的分解纤维索的真菌有野生型的曲霉、青霉、木霉等，细菌有纤维索单胞菌、纤维弧菌，在有氧条件下起分解纤维素作用的主要是真菌，可利用这些特点设计筛选方案。天然纤维素原料是地球上最丰富的可再生有机物质。全世界通过光合作用产生的植物物质每年高

7、达2000亿t,冃前有89%未被人类利用，只有11%用作饲草、造纸和建筑原料。绝大部分的天然纤维素原料在自然环境屮被齐种微生物分解转化，最终形成CO2和H2O。虽然这是生态系统屮碳循环的一个重要环节，但从人类利用自然资源的角度看，无疑是巨人的浪费。在我国，人部分秸秆和树林副产品被用作燃料或在田间被直接烧掉，不但破坏了生态平衡，污染环境，还存在火灾隐患。发展和利用生物技术分解转化天然纤维索原料既是资源利用的有效途径，而口对于解决环境污染、粮食短缺和能源危机也具有重人的现实意义。纤维索分解菌分为降解纤维素细菌、降解纤维素放线菌、降解纤

8、维素真菌。生物降解纤维素研究进程屮有待解决的问题：①H前用于生产纤维索酶的菌株多为木霉、青霉和曲霉等，普遍存在酶活力较低的问题。筛选高效纤维素分解菌是利用秸秆纤维素的关键。②纤维素酶价格贵，利用成本高，要使纤维素酶真正能够应用于生产，必须设法降低纤