生物化学习题(2)

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1、生物化学习题第一章蛋白质化学1、向1升1mol/L的处于等电点的甘氨酸溶液加入0.3molHCl,问所得溶液的Ph是多少?如果加入0.3molNaOH以代替HCl时,pH值将是多少?[pH:2.71;9.23]2、将丙氨酸溶液(400毫升)调节到pH8.0,然后向该溶液加入过量的甲醛。当所得溶液用碱反滴定至pH8.0时,消耗0.2mol/LNaOH溶液250毫升。问起始溶液中丙氨酸的含量为多少克?[4.45g]3、将含有天冬酸(pI=2.98),甘氨酸(pI=5.97),苏氨酸(pI=6.53),亮氨酸(pI=5.98)和赖氨酸(pI=9.74)的pH3.0柠檬

2、酸缓冲液,加到预先用同样缓冲液平衡过的Dowex-50阳离子交换树脂中,随后用该缓冲液洗脱此柱,并分部地收集洗出液,这5种氨基酸将按什么次序洗脱下来?[Asp,Thr,Gly,Leu,Lys]4、指出在正丁醇:醋酸:水的系统中进行纸层析时,下列混合物中氨基酸的相对迁移率(假定水相的pH为4.5):(1)Ile,Lys;(2)Phe,Ser;(3)Ala,Val,Leu;(4)Pro,Val;(5)Glu,Asp;(6)Tyr,Ala,Ser,His。[Ile>Lys;Phe>Ser;Leu>Val>Ala;Val>Pro;Glu>Asp;Tyr>Ala>Ser≈

3、His]5、(1)当Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合物在pH3.9进行纸电泳时,哪些氨基酸移向正极(+)?哪些氨基酸移向负极(-)?(2)纸电泳时,带有相同电荷的氨基酸常有少许分开,例如Gly可与Leu分开。试说明为什么?(3)设Ala、Val、Glu、Lys和Thr的混合物pH为6.0,试指出纸电泳后氨基酸的分离情况。[(1)Ala,Ser,Phe和Leu以及Arg和His移向负极;Asp移向正极。(2)电泳时,具有相同电荷的较大分子移动得慢,因为电荷/质量之比较小,因而引起每单位质量迁移的驱动力也较小。(3)Glu移向正极;Lys

4、移向负极,Val,Ala和Thr留在原点。]6、有一个A肽:经酸解分析得知由Lys、His、Asp、Glu2、Ala、以及Val、Tyr和两个NH3分子组成。当A肽与FDNB试剂反应后,得DNP-Asp;当用羧肽酶处理得游离缬氨酸。如果我们在实验中将A肽用胰蛋白酶降解时,得到二种肽,其中一种(Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr)在Ph6.4时,净电荷为零,另一种(His、Glu、以及Val)可给出DNP-His,在Ph6.4时,带正电荷。此外,A肽用糜蛋白酶降解时,也得到二种肽,其中一种(Asp、Ala、Tyr)在pH6.4时呈中性,另一种(Lys、His、

5、Glu2、以及Val)在Ph6.4时,带正电荷。问A肽的氨基酸顺序如何?[Asn—Ala—Tyr—Glu—Lys—His—Gln—Val]7、某多肽的氨基酸顺序如下:GluValLysAsnCysPheArgTrpAsp15LeuGlySerLeuAlaThrCysArgHisMetAspGlnCysTyr101520ProGlyGluGluLys。(1)如用胰蛋白酶处理,此多肽将产生几个肽?2529并解释原因(假设没有二硫键存在);(2)在pH7.5时,此多肽的净电荷是多少单位?说明理由(假高pK+6.0;

6、Glu和Asp侧a值:α-COOH4.0;α-NH3链基4.0;Lys和Arg侧链基11.0;His侧链基7.5;Cys侧链基9.0;Tyr侧链1基11.0);(3)如何判断此多肽是否含有二硫键?假如有二硫键存在,请设计实验确定5,17和23位上的Cys哪二个参与形成?[(1)4个肽;(2)-2.5单位;(3)如果多肽中无二硫键存在,经胰蛋白酶水解后应得四个肽段;如果存在一个二硫键应得三个肽段并且各肽段所带电荷不同,因此可用离子交换层析、电泳等方法将肽段分开,鉴定出含二硫键的肽段,测定其氨基酸顺序,便可确定二硫键的位置。]8、今有一个七肽,经分析它的氨基酸组成是

7、:Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr和Ser。此肽未经糜蛋白酶处理时,与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸。经糜蛋白酶作用后,此肽断裂成两个肽段,其氨基酸组成分别为Ala,Tyr,Ser和Gly,Phe,Lys,Arg。这两个肽段分别与FDNB反应,可分别产生DNB—Ser和DNP—Lys。此肽与胰蛋白酶反应,同样能生成两个肽段,它们的氨基酸组成分别是Arg,Gly和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala。试问此七肽的一级结构是怎样的?[它是一个环肽,顺序为—Phe—Ser—Ala—Tyr—Lys—Gly—Arg—]9、今有一种植物的毒素蛋白。直接

8、用SDS凝胶电泳分析时,

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