2019版高考生物大一轮复习 第43讲 基因工程优选学案

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1、第43讲 基因工程考纲要求考情分析命题趋势1.基因工程的诞生(Ⅰ)2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)3.基因工程的应用(Ⅱ)4.蛋白质工程(Ⅰ)2017,江苏卷,33T      2017,全国卷Ⅰ,38T2016,全国卷Ⅰ,40T2016,天津卷,7T2016,江苏卷,33T2015,全国卷Ⅰ,40T2015,全国卷Ⅱ,40T2015,北京卷,5T本讲是现代生物科技专题的重点,考查频率较高,预计明年的全国卷中,以非选择题的形式考查基因工程的原理、操作技术及应用的可能性较大分值:6~

2、16分考点一 基因工程的操作工具及程序一、基因工程的基本工具1.限制性核酸内切酶(1)来源:主要从__原核生物__中分离。(2)作用:切断两个核苷酸之间的__磷酸二酯键__。(3)作用特点:专一性,即限制酶可识别__特定的脱氧核苷酸序列__,切割特定位点。(4)结果2.DNA连接酶常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源__大肠杆菌__T4噬菌体功能连接黏性末端连接__黏性末端或平末端__结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3.载体(1)常用载体——质粒(2)其他载体:λ

3、噬菌体衍生物、__动植物病毒__等。二、基因工程的基本操作程序1.目的基因的获取(1)目的基因:编码蛋白质的基因。(2)获取方法:从基因文库中获取、利用__PCR技术__扩增目的基因、利用__DNA合成仪__人工合成。2.基因表达载体的构建——基因工程的核心(1)目的:使目的基因在受体细胞中__稳定存在__,并可以遗传给下一代;使目的基因能够__表达__和发挥作用。(2)基因表达载体的组成:目的基因、__启动子__、终止子和标记基因等,如图。3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测和鉴定(1

4、)检测:(2)鉴定:个体水平。1.判断正误,正确的画“√”,错误的画“×”。(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶。( × )(2)DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合,形成重组DNA。( × )(3)E·coliDNA连接酶既可以连接平末端,又可以连接黏性末端。( × )(4)Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶。( × )(5)基因表达载体中含有启动子和终止密码子。( × )(6)如果某种生物的cDNA文库中的

5、某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同,则这两个基因的结构也完全相同。( × )(7)目的基因导入马铃薯细胞后,可随着马铃薯DNA分子的复制而复制,传给子代细胞并表达。( × )(8)应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否表达。( × )2.若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理

6、的是( D )A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体解析 解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向,只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。3.下列关于载体的叙述中,错误的是( D )A.载体与目的基因结合后,实质上就是一个

7、重组DNA分子B.对某种限制酶而言,载体最好只有一个切点,但还要有其他多种酶的切点C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒D.载体具有某些标记基因,便于对其进行切割解析 载体带有特殊的标记基因,如抗生素抗性基因,以便于对外源基因是否导入进行检测。确定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类①应选择切点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择PstⅠ。②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择SmaⅠ。③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使

8、用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致,以确保具有相同的黏性末端。②质粒作为载体必须具备标记基因等结构,所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因;如果所选酶的切点不止一个,则切割重组后可能会丢失某些片段,若丢失的片段含复制起区,则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。一 基因工程的概念与操作工具分析

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