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1、目录1绪论02实验部分22.1仪器、试剂与材料22.1.1实验仪器22.1.2实验试剂22.1.3器皿22.1.4实验材料22.2实验方法22.2.1对续断菊甲醇提取物进行处理22.2.2萃取部分22.3生物活性测定32.3.1DPPH（1,1--苯基苦基苯月井）自由基清除能力的测定32.3.2超氧化物歧化酶（SCD）活力测定42.3.3轻基自由基消除能力的测定43结果与讨论53.1DPPH自由基清除能力的测定结果与讨论53.1.1不同层样品对DPPH自由基清除率53.1.2不同层样品对DPPH自由基清除
2、能力柱形图53.1.3计算各层得出的ECso结果63.2超氧化物歧化酶（SCD）活力测定结果与讨论63.2.1超氧化物歧化酶（SCD）活力测定数据63.2.2超氧化物歧化酶（SCD）活力测定柱形图63.3^基自由基消除能力的测定结果与讨论73.3.1轻基自由基消除能力的测定数据73.3.2轻基自由基消除能力的测定柱形图7结论8参考文献9致谢101绪论续断菊（Sonchusasper（L.）Hill.）,异名：石白头,菊科苦苣菜属,分布于长江流域各省区,原产欧洲，遍及各洲。为药用植物,一般用作润滑剂。一年生
3、草本,高30-70cm。根纺锤状或圆锥状。茎分枝或不分枝，无毛或上都有头状腺毛。茎上部棕黄色至棕绿色，中空。叶两面几乎同色、无毛。总苞片顶端不扩大。花黄色,全为舌状花。瘦果浅褐色,无斑纹及明显的光泽,两面各具三肋⑶。冠毛非羽毛状,顶端不变粗。菊科苦苣菜属的许多种类在民间作为药用植物使用,大多具有清热解毒、消肿排脓及凉血利温等功效⑴。苦苣菜属植物主要含倍半砧类及黄酮类化合物，此外还含有香豆素类、木脂素类、甘油酸醇昔类等化合物.该属植物及其提取物具有保肝、抗肿瘤、利尿、降血糖、降血压、降胆固醇、抗炎、抗氧化、
4、抗凝血、抗菌、解毒、对脑缺血缺氧脑保护等药理作用.所以对其化学成分进行分离和研究显得非常重要⑵。关于续断菊的提取及其理化性质已有部分报道，但是关于它的抗氧化性能鲜见报道。作者通过提取续断菊并测定其生物活性,为更好的利用开发续断菊提供依据。氧化对于许多给生物过程提供能量的生物体而言是必不可少的，自由基也是维持生命所必需。20世纪50年代中期Harman首先提出衰老的自由基学说⑷。他认为衰老是自由基（主要为氧自由基）对细胞成分的有害攻击所造成的.以氧为中心的活性氧种类，比如超氧自由基（Ch）轻基自由基（・OH
5、）、过氧自由基（ROOJ和氮氧自由基（NO-）,会袭击生物分子，如脂类、蛋白质、酶、DNA、RNA,导致细胞或组织损伤与老化、动脉粥样硬化和癌变，引起机体衰老器官病变⑸等。抗氧化剂是所有能够阻止或延缓氧化过程的物质的总称,在食品、化工、医药及临床上有着广泛的应用⑹。抗氧化剂不仅可以防止由空气氧化引起的食物腐败及各种不利变化（如褐变或产生“虎皮”）,而且还可消除人体有氧代谢中产生的内源性活性氧自由基，阻断过多自由基对人体细胞膜及大分子（如蛋白质、DNA）的损伤，防止炎症及恶性肿瘤的发生⑺，因此出现了“抗氧化
6、剂营养"的概念罔。另外,人类不断的暴露于多种毒物的侵害中,如烟酒、药物副作用、农药等环境污染。现已证明，这些有毒物质对人体的损害大多是通过自由基起作用，而抗氧化剂治疗是有效的方法⑼。本文中主要采用DPPH（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）法、硫代巴比妥酸法（轻基自由基消除）以及超氧化物歧化酶（SOD）活力三方面来测定续断菊甲醇提取物的抗氧化活性，发现续断菊具有很强的抗氧化作用。为天然抗氧化剂的研究开发奠定了基础［旧。2实验部分2.1仪器、试剂与材料2.1.1实验仪器HH-8恒温
7、水浴锅（金坛市杰瑞尔电器有限公司）；KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AS3120A超音清洗器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；R-201旋转蒸发仪（上海申胜生物技术有限公司）；SHB-IIIA循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；IS09001电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；SHG-9070型电热恒温鼓风干燥箱；GG-172L分液漏斗（四川蜀玻集团有限责任公司）；台式离心机TD4-II（湖南仪器仪表总厂离心机厂）；UV-2550紫外可见分光光度计（日本岛津X2.1.
8、2实验试剂甲醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等分析纯试剂（天津市科密欧化学试剂有限公司）；DPPH（1,1-二苯基-2■三硝基苯月井0.2mmol/L）；pH8.5tris-HCl缓冲液（50mMtris+10mMEDTA）；邻苯三酚（7.2mM/L）；HCI（1mol/L）；DMSO（二甲基亚砚）、FeSO4-7H2O（10mM/L）；EDTA（乙二胺四乙酸酸根离子10mM/L）2■脱氧核糖（10mM/L）；磷酸盐缓冲
