食管癌患者外周血cd4+cd25+foxp3+调节性t细胞检测及其临床意义

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1、食管癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及其临床意义付白清，吴朝阳，许亚平，王法春，陈巧云【摘要】　　目的：通过检测食管癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化，观察其与临床及病理特征之间的关系，探讨其临床意义。方法：采用流式细胞术检测30例食管癌患者及16例健康志愿者外周血单个核细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例；收集食管癌患者的临床及病理资料，分析研究Treg细胞变化与临床及病理特征之间的关系。结果：流式细胞术检测显示食管癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例为(3.72±1

2、.39)%，高于对照组(1.15±0.36)%，P0.01；食癌管患者外周血中Treg细胞比例与患者的年龄、性别、肿瘤的位置无明显相关性（P>0.05）,而与淋巴结转移情况及TNM分期有明显的相关性(P0.05)。结论：CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能在食管癌免疫耐受中发挥重要作用，检测其比例对于判断食管癌的病期及预后有一定价值。【关键词】调节性T细胞；食管癌；流式细胞术　　〔Abstract〕Objective:TofindoutthechangeofCD4+CD25+Foxp3+regulatoryTcellsinperipheralbloodofesophagealc

3、ancerpatients,therelationshipbetetryononuclearcells（PBMCs)from30patientsesophagealcancerpatientsor,categoryofpathologyandtheinfiltratingdepthoftumor(P>0.05).TheproportionofTregcellsinPBMCofcancerpatientsphnodemetastasisandstagesofTNM(P0.05).Conclusion：Tregmayhaveanimportantroleinimmunetoleranceof

4、esophagealcancer.DetectionofTregcellshaveclinicallyvalueonevaluationofdevelopmentandprognosisofesophagealcancer.　　〔Keyetry　　调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg)是近年来确定的一类具有免疫调节功能的T细胞亚群,在维持机体免疫自稳、调控免疫应答方面起重要作用。Foxp3是其分化发育的关键基因〔1〕。CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在肿瘤免疫耐受机制中发挥的作用近来备受瞩目,多种肿瘤患者机体内外周血及肿瘤局部均有调节性T细胞的比例增高。我们检测了30

5、例食管癌患者的外周血中细胞表型CD4+CD25+及其特异性标志Foxp3的变化,并将这些改变与临床资料进行比较分析,探讨Treg细胞在肿瘤发展及免疫应答中的调控作用。　　1资料与方法　　1.1临床资料　食管癌患者30例,来源于2007年10月～12月在我院胸外科的住院患者,男16例,女14例,年龄33～81岁,平均(60.60±11.83)岁。健康志愿者16例做对照,其中男11例,女5例,年龄33～68岁,平均(49.81±10.76)岁。肿瘤患者术前未进行放疗和化疗，且排除糖尿病及自身免疫系统疾病。术后病理检查发现,肿瘤位于上段3例,中段18例,下段9例；肿瘤TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期10例,Ⅲ+

6、Ⅳ期20例；肿瘤淋巴转移阳性者19例,阴性11例。　　1.2主要试剂荧光抗体鼠抗人CD4FITC,CD25APC,Foxp3PE单克隆抗体，阴性对照鼠抗人IgG2aFITC,IgG2aAPC,IgG2aPE均购自eBioscience公司。　　1.3方法抽取静脉血2ml,EDTA抗凝,以淋巴细胞分离液常规分离单个核细胞（PBMC），计数细胞后调整细胞浓度至1×106/ml。流式细胞仪检测，以CD4设门，分析门内CD4+CD25+Foxp3+细胞亚群，每份标本计数105个细胞，结果以CD4+CD25+Foxp3+细胞占CD4+细胞的比例表示。　　1.4统计学处理应用SPSS12.0软

7、件处理实验结果，计量资料用均数±标准差表示，组间比较采用t检验，以P0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞流式细胞仪检测结果流式细胞仪检测发现,食管癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占总CD4+T细胞的比例为(3.72±1.39)%,健康对照组为(1.15±0.36)%。食管癌患者外周血Treg细胞较健康对照组显著增高(P0.01