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时间:2018-11-23
《胸水p16基因纯合性缺失的检测及临床应用价值》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、胸水p16基因纯合性缺失的检测及临床应用价值于薇长春市人民医院检验科,吉林长春130051[摘要]目的探讨胸水p16基因纯合性缺失的检测及其在临床上的应用价值。方法选取该院2010年12月—2014年6月收治的伴有胸水的肺癌患者176例,随机分为对照组和PCR组各88例,对照组应用胸水脱落细胞学检测,PCR组应用PCR技术检测纯合性缺失,比较阳性率。结果对照组88例肺癌所致癌性胸水患者的标本中有52例出现胸水脱落细胞血阳性结果,其阳性率为59.09%;PCR组88例肺癌所致癌性胸水患者的标本中没有出现一例p16基因第一外显子纯合性缺失,但是有35例p
2、16基因第二外显子纯合性缺失,其阳性率为39.77%。阳性对照组优于PCR组,经统计学处理差异有统计学意义(P<0.05)。结论将p16基因作为肺癌治疗的靶基因具有可行性,同时胸水p16基因纯合性缺失的检测方法不仅方便,而且准确率高,可以作为癌症检测和预后的重要辅助手段,为广大的肺癌患者带来福音,值得临床推广。 胸水p16基因纯合性缺失的检测及临床应用价值于薇长春市人民医院检验科,吉林长春130051[摘要]目的探讨胸水p16基因纯合性缺失的检测及其在临床上的应用价值。方法选取该院2010年12月—2014年6月收治的伴有胸水的肺癌患者176
3、例,随机分为对照组和PCR组各88例,对照组应用胸水脱落细胞学检测,PCR组应用PCR技术检测纯合性缺失,比较阳性率。结果对照组88例肺癌所致癌性胸水患者的标本中有52例出现胸水脱落细胞血阳性结果,其阳性率为59.09%;PCR组88例肺癌所致癌性胸水患者的标本中没有出现一例p16基因第一外显子纯合性缺失,但是有35例p16基因第二外显子纯合性缺失,其阳性率为39.77%。阳性对照组优于PCR组,经统计学处理差异有统计学意义(P<0.05)。结论将p16基因作为肺癌治疗的靶基因具有可行性,同时胸水p16基因纯合性缺失的检测方法不仅方便,而且准确
4、率高,可以作为癌症检测和预后的重要辅助手段,为广大的肺癌患者带来福音,值得临床推广。.jyqkb等发现的一种新的抗癌基因,它是细胞周期中的一种基本基因,其作用是直接参与细胞周期的调控,对细胞增殖和分裂进行负调节[3]。目前,经研究发现有细胞周期刹车装置之称的p16基因,在人类肿瘤细胞中出现纯合性缺失的现象,同时经临床研究证实很多癌症的形成都与p16基因的缺失和突变有关[4]。因此,对p16基因进行纯合性缺失的检测具有重要的临床意义。将该院2010年12月—2014年6月收治的患者为研究对象,采用胸水p16基因纯合性缺失的检测肺癌收到了较好的效果,现报
5、道如下。1资料与方法1.1一般资料将该院收治的伴有胸水的肺癌患者176例,随机分为两组,其中对照组88例,男61例,女27例,年龄41~75岁,平均年龄58岁;PCR组88例,男62例,女26例;年龄42~74岁,平均年龄58岁。两组在年龄和性别方面差异无统计学意义,具有可比性。1.2治疗方法1.2.1对照组在征得患者同意的情况下,对患者的穿刺部位通过超声定位后,协助患者采取合适的体位,局部消毒和麻醉后,进行常规的胸腔穿刺。其具体步骤如下:用左手食指和中指将穿刺部位的皮肤固定,右手调整穿刺针的三通活栓装置,使其与胸腔处于关闭状态后,在麻醉处将穿刺针缓
6、缓刺入,若针锋的抵抗感突然消失时,则调整三通活栓使其与胸腔相通,进行抽取胸水,抽取结束方可拔出穿刺针。取出一定量的胸水后,进行胸水脱落细胞学检测,其检测步骤如下:离心、制片、干燥、染色,其中染色尤为重要,若染色较深,则背景会影响判断;若染色较浅,则不易看出细胞的形态。染色后,将固定好的片子放在显微镜下观察,检测细胞学变化,进行结果统计分析。1.2.2PCR组胸水采集的方法与对照组一致,取患者的一定量(10mL)的胸水后,离心(3000转/min,10min),沉淀物加生理盐水混悬后,再加DNA提取液和相关试剂逐步提取和纯化DNA模板。在PCR扩增过程
7、中,要加入PCR试剂,其中PCR的五种关键要素是p16第一外显子和第二外显子引物、dNTP、Taq酶、Mg2+和模板,放入PCR仪中扩增,其PCR条件是预变性94℃、5min后,变性94℃、30s,复性55℃、30s,延伸72℃、30s,将变性、复性和延伸循环30次后,再延伸70℃、5min,最后4℃保存产品。配制2%的琼脂糖凝胶,用水平电泳仪进行电泳40min后,紫外下扫描照相后,检测吸光度值,进行结果统计分析。1.3统计方法应用SPSS11.0软件对数据进行分析,计数资料用率表示,行χ2检验。2结果两组数据比较,阳性率行χ2检验,χ2=6.17,
8、P=0.034,P<0.05,说明经处理差异有统计学意义,见表1。3讨论肺癌是发病率较高的呼吸系统肿瘤疾病,
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