银杏叶提取物对脂质诱导胰岛素抵抗大鼠脂肪肝的干预作用

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1、银杏叶提取物对脂质诱导胰岛素抵抗大鼠脂肪肝的干预作用作者：夏瑾玮黄高忠张秀珍叶希韵陈雅娟钟远【摘要】目的探讨胰岛素抵抗（IR）与糖脂代谢、脂肪肝之间的相互关系,为银杏叶制剂用于早期预防脂肪肝和进一步治疗提供实验依据。方法选取健康成年SD雄性大鼠40只,体重200～250g,适应性饲养1g/片，葛兰素史克公司提供；银杏叶提取物(银杏总黄酮≥44%）为上海杏灵科技药业股份有限公司研发的一种新型银杏叶提取物制剂。　　1.1.3试剂　　南京建成生物制品研究所提供总抗氧化能力（TAOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、游离脂肪酸（FFA）、谷丙转氨酶（ALT/GPT）、谷

2、草转氨酶（AST/GOT）、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒；美国Linco公司提供Ins试剂盒；甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血清高密度脂蛋白（HDLC）测试盒购于温州津玛生物科技有限公司；葡萄糖酶法测定试剂盒、血清低密度脂蛋白（LDLC）测试盒，购于上海科欣生物技术研究所；胰岛素放射免疫分析测试盒购于北京北方生物技术研究所。　　1.1.4仪器设备　　日立7600型全自动生化分析仪；国产全自动放射免疫γ计算仪；芬兰LABSYSTEMSMULTISKANMS(353型)酶标仪；上海产802型低速离心机；日产岛津UV2100分光光度仪。　　1.2方法　　1.2.1造模与分

3、组　　适应性饲养1g·kg-1·d-1,压碎，1次/d,连续8)〔4〕。　　1.2.5内脏形态学观察　　取大鼠肝组织，称湿重后用10％甲醛液固定,切片、HE染色，光镜下观察组织学改变，并用计算机彩色图像分析肝脏脂肪变性程度；测定大鼠肝脏湿重,并计算肝体比(肝脏湿重/体重×100%)。　　1.3统计学分析　　所有数据以x±s或百分比表示，对计量资料进行正态性、方差齐性检验，非正态及方差不齐者,进行自然对数转换。两组间比较采用t检验，多组间的比较采用方差分析；多因素分析采用Logisitic回归分析；组间率的比较用χ2检验。采用SAS6.12统计软件进行处理。　　2结果　　2.1一

4、般状况　　正常组大鼠体重增加明显,精神状态良好,反应灵敏,皮毛有光泽,动作自如。模型组大鼠明显肥胖,多饮、多尿、多食,精神萎靡，反应迟钝，毛竖无光泽，动作迟缓,弓背蜷体。各治疗组与模型组相比,精神状态尚可,动作尚自然灵活,体重增加,饮水量减少,尿量减少,其中阳性药物组大鼠一般状态较模型组好，银杏叶组大鼠表现较阳性药物组状态好。提示银杏叶制剂治疗后,可以使IR大鼠的多饮、多尿和肥胖等症状得以明显的减轻。　　2.2各组大鼠肝脏重量及其肝体比的比较　　实验12mol/L,根据FPB＞7.0mmol/L伴IR为造模成功的标准,本实验造模动物80%达到要求;12.　　2.4各组大鼠的血脂

5、代谢比较　　模型组大鼠体型短而粗壮,其Lee′s指数明显增加,与其他各组比较均有统计学差异(P<0.01)。相关分析结果表明:各组大鼠Lee′s指数的变化与相应的体重增加、腹腔脂肪湿重及血TC、TG、LDLC呈高度正相关，r值分别为0.8044、0.8583、0.7290、0.7612、0.7048，均P<0.01,而与HDLC呈高度负相关(r=0.7504，P<0.01)。模型组大鼠血浆动脉硬化指数(atherogenicindexofplasma,AIP),明显高于正常组(P＜0.01)。经治疗后,血脂代谢及AIP指数有明显改善,阳性药物组疗效优于银杏

6、叶组。见表3～表5。表3各组大鼠Lee′s指数及其腹腔脂肪湿重比较(略)表4各组大鼠血脂含量及AIP比较(略)表5各组大鼠肝生物化学指标变化(略)　　2.5各组大鼠肝生化指标的比较　　与正常组相比,模型组大鼠的肝组织TG、FFA、ALT、AST均显著升高；治疗组的肝组织TG、FFA明显降低,但仍高于正常组,两组治疗效果相比无显著差异(P>0.05)。与正常组比较,模型组肝组织MDA活性显著升高、TAOC及SOD活性显著降低(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组均可使IR大鼠肝组织SOD活性及TAOC升高、MDA活性降低(P<0.01)。治疗后,TAOC

7、/MDA逐渐增加,提示机体的综合氧化应激状态逐渐改善。TAOC和MOA的相关性分析显示两者呈负相关(r=-0.312,P<0.01)。见表5。　　2.6胰岛素抵抗的危险因素Logistic回归分析　　以正常组与模型组为研究对象,HOMAIR为应变量,体重、FPG、FFA、FINS、2hINS、TC、TG、LDLC、NO、ET1和AngⅡ为自变量，Logistic回归分析(ForanKG，FonsecaV，TanMH,etal.Narrativerevieellitus〔J〕.A