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时间:2018-11-20
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1、病理生理学实验沧州医专病理教研室李志红缺氧实验目的1.复制乏氧性、血液性、CO中毒性缺氧。2.观察不同类型缺氧时呼吸和血液颜色的变化。3.通过机体神经系统机能状态改变、外界环境温度变化对缺氧耐受性的影响,了解条件因素在缺氧发病中的重要性和临床应用冬眠、低温治疗的实用意义。【实验原理】氧是生命活动所必需的物质。当组织得不到充足的氧或不能充分利用氧时,组织的代谢、功能、甚至于形态结构都可能发生异常变化,这个病理过程就叫做缺氧。根据缺氧的原因和血氧指标的变化,把缺氧分为了4个类型,包括乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧。不同的缺氧条件均可造成动物的缺氧状态,并表现
2、出相应的机能代谢改变。但动物的不同年龄、不同机能状态,对缺氧的耐受能力也不尽相同【实验动物】成年小白鼠及初生小白鼠【药物与器材】钠石灰,甲酸,浓硫酸,5%亚硝酸钠,1%美兰,0.1%氰化钾,生理盐水。1%咖啡因,0.25%氯丙嗪,生理盐水,温水,碎冰块,制冰机,恒温水浴箱小白鼠缺氧瓶(100~125ml带塞锥形瓶或广口瓶),CO发生装置,广口瓶,5ml和2ml刻度吸管,lml注射器,酒精灯,剪刀,锤子,温度计,天平,剪刀,镊子等【实验步骤】一、几种类型的缺氧1.乏氧性缺氧(1)取钠石灰少许(约5克)放入缺氧瓶内,小白鼠一只放入此缺氧瓶内,观察动物的一般情况,呼吸频率、深
3、度、皮肤和口唇的颜色,然后塞紧瓶塞,记录时间,观察动物缺氧后的表现与正常有何不同,直到动物死亡为止。记录死亡时间。(2)保留动物尸体,待2、3、4实验做完后,再依次打开其腹腔,比较血液和内脏的颜色。2.一氧化碳中毒性缺氧(1)装好CO发生装置(2)将小白鼠一只放入广口瓶中,观察其正常表现,然后与CO发生装置连接。(3)取甲酸3ml放入试管内,加入浓硫酸2ml,塞紧,若CO产生不足,可用酒精灯在试验管底部加热,加速CO的产生,但不可以过热至液体沸腾,以防试管爆炸或CO产生过多过快,动物死亡,血液颜色改变不明显。(4)观察指标与方法同上。CO发生装置3.亚硝酸钠中毒性缺氧(
4、1)取体重相近的两只小白鼠,观察正常表现后,分别向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml,其中一只注入亚硝酸钠后,立即向腹腔内注入1%美兰溶液0.3ml,另一支注入生理盐水0.3ml。(2)观察指标与方法同上,比较两鼠表现及死亡时间有无差异。4.氰化钾中毒性缺氧(1)取小白鼠一只,观察正常表现后,腹腔注射0.1%氰化钾0.2ml。(2)观察指标同上。5.另取一只正常小白鼠,用颈椎脱臼法处死,与上述四只小白鼠依次打开其腹腔,比较血液和内脏的颜色。二、影响缺氧耐受性的因素1.环境温度变化对缺氧耐受性影响(1)取小白鼠缺氧瓶三个。各放入钠石灰少许。(2)取500m1烧杯二个,一个加碎
5、冰块和冷水、将其水温调到0~4℃,另一个加入热水,其温度调到40~42℃。(3)取体重相近的小白鼠三只,称重后,分别装入缺氧瓶内,将三个缺氧瓶分别置于冷水、室温、温水中,瓶塞盖紧后开始计时。(4)持续观察各鼠在瓶中的活动情况,待小鼠死亡后,计算存活时间。比较三只小白鼠表现及死亡时间有无差异。2.神经系统机能状态不同对缺氧耐受性的影响(1)取体重相近的小白鼠三只甲鼠:腹腔注射咖啡因0.1m1/10g体重。乙鼠:腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1m1/10g体重.丙鼠:腹腔注射0.25%生理盐水0.1m1/10g体重。(2)约15~20分钟后,将三只小白鼠分别放入有钠石灰的缺氧
6、瓶内,密闭后开始计算存活时间。比较三只小白鼠有何差异。3.年龄对缺氧耐受性的影响新生小白鼠和成年小白鼠一同放入缺氧瓶内,分别记录其死亡时间。【实验结果】不同类型缺氧时观察指标的结果比较呼吸变化皮肤黏膜颜色血液肝脏颜色生命持续时间正常乏氧性缺氧CO中毒NaNO2中毒氰化物中毒环境温度变化对缺氧耐受性影响实验条件存活时间常温冷水热水神经系统机能状态不同对缺氧耐受性的影响实验条件死亡时间腹腔注射咖啡因腹腔注射0.25%氯丙嗪腹腔注射0.25%生理盐水年龄因素对缺氧耐受性的影响新生鼠成年鼠活动(行为)生命持续时间【注意事项】1.缺氧瓶一定要密闭,可用凡士林油涂在瓶塞边缘。2.小
7、白鼠腹腔注射,应稍靠左下腹,勿损伤肝脏,也应避光将药液注入肠腔及膀胱内。3.氰化钾有剧毒,应妥善保存,使用时勿沾染皮肤、黏膜、特别是破损处,实验后将物品洗干净。4.一氧化碳有毒,防止其过度溢出。5.在血液肝脏颜色的对比观察时,事先编号,以免搞错。【讨论思考题】1.一氧化碳中毒和亚硝酸钠中毒性缺氧血液颜色有何异同?2.在乏氧性缺氧实验中,如果缺氧瓶中不加钠石灰对实验结果有何影响?3.通过本实验解释低温麻醉的原理?谢谢
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